Re: [求救] 利用BSA與奶粉blocking步驟是否一樣?

[cmublue (BLUE)]

※ 引述《jajshigogo (唉唷喂~)》之銘言：
: 大家好
: 我們實驗室目前是用安佳脫脂奶粉+TBST blocking 室溫1小時後上一抗
: 抗體也是泡在含0.1%奶粉的TBST中 不reuse
: 我之後會做到磷酸化抗體 所以會用BSA blocking
: 網路查一般是使用 5% BSA blocking
: 我的問題是 5% BSA 大家是用PBST or TBST配製?
: 也是blocking 1小時嗎?
: 抗體泡在5% BSA後可以reuse使用
: 是保存在4度就可以了?
: 請問可以reuse幾次?
: 抱歉 問題有點多


抱歉 借文章一問

想請問板上各位先進

文中提到抗體是泡在0.1%牛奶內，

請問如果我是泡在一般的blocking buffer (5%牛奶)

會有影響嗎?

另外，有人用1% 也有人用 5% BSA來blocking，有什麼差別嗎?

且有一說用BSA的blocking時間需要久一點，請問有確切的condition嗎? (時間/溫度)

and我的某支抗體(Santa)用1% BSA blocking以及泡抗體

結果超髒，是否該改用5%BSA再試試看




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◆ From: 123.192.112.119
※ 編輯: cmublue         來自: 123.192.112.119      (05/11 20:26)
推 caesar0926:順便問有人用過這個產品嗎?HyBlock 1 min Blocking
→ caesar0926:號稱一分鐘 非蛋白blocking 還可用在IHC 頗神
→ caesar0926:不知道有沒有人用過 謝謝大家!!
推 jasonstudio:我會用5% BSA BLOCKING 0.5~1%泡抗體 參考看看
→ jasonstudio:5% BSA blocking RT 一小時以上吧 看你趕不趕時間
→ a90648:5% BSA不趕時間我就室溫丟著3~4小時吧，趕的話至少一小時
→ formoxa:HyBlock 我們有在用，聽起來超神，不過就只是1分鐘跟
→ formoxa:1小時差別，該髒的一樣髒