→ vandia:我想問題應該出在"新鮮的肝直接浸OCT"這一步吧...= = 05/16 23:39
→ vandia:中間的步驟也省略太多...隨便google任何一個冷切步驟就知道 05/16 23:39
推 homeshawn:請在包埋前用蔗糖溶液脫水。。。。 05/29 03:12
→ homeshawn:此外，不知可有灌流過？ 05/29 03:13
請問各位有做ORO染色的大家幫忙解答
為什麼我的切片上會有明顯的乾燥裂痕
實在不好觀察及拍攝
小弟是用ORO來染老鼠liver中的lipid
在老鼠犧牲的當下
新鮮的肝組織隨即包埋進OCT(冷凍包埋劑)中冷凍保存
再以-15度C的環境進行冷凍切片
切完結束隨即進行染色
以下附上小弟的protocol
fixation in formalin 1 min
wash (簡單以top water沖洗玻片背面)
ORO (已以3:2稀釋) stain in 10~15 min
wash
hematoxylin (原倍) stain in 5 min
wash
封片觀察
網路上有搜尋到很多不同染ORO的方法
小弟均以嘗試過
可是仍然無法改善玻片上sample過於乾裂導致的裂痕
請有染色經驗的大大幫忙提供解決之道~
感恩>"<
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