[求救] MTT測不出存活率

[chaneyunnsha (YOBO!)]

呃

不好意思想請教一下各位板友!

最近做實驗想要看我的樣品(植物的萃取物)對細胞的存活率影響

不過發現到如果在高劑量的組別

細胞數量會明顯的減少 (這部分我另外貼dish觀察型態時發現)

或者是要加DMSO溶結晶紫的步驟前有先在顯微鏡底下看

高劑量處理組結晶紫的數目是明顯比控制組少很多

不過加入DMSO之後~

最後測得的吸光值跟控制組都差不多 (吸光大約在0.9~1.1之間)



我猜測是否有可能在高劑量的濃度下樣品對細胞有毒性

但同時也可能對粒線體的酵素有影響

所以造成有細胞較少 不過最後吸光值不受影響測不出存活率上的差異~

有這可能嗎???  謝謝

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.130.90.195
推 iceking:MTT本來就不是很靈敏的測試方法,換個方法吧~
→ iceking:現在很多儀器可以數細胞,算存活率,功能都滿強大的~
推 aborwang:也許是結晶紫沒有被溶出來，我用37度shaking 10min
推 TW185930:我們家也是做這方面的，紫色結晶看似很多，但實際上沒那
→ TW185930:麼多! 高劑量細胞會死，尤其是你的藥有顏色，也會干擾mtt
→ TW185930:分析
→ TW185930:可以改用xtt 那種螢光染劑，可以避開藥物顏色干擾== 不過
→ TW185930:我們實驗室沒錢沒得買~
推 csmceddie:吸光在0.2-0.8之間比較準 超過太多飽和了 就不準了
→ natual:wst-1無毒性又簡單操作
→ qqaz:改MTS試試