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大家好 目前我們實驗室用tri reagent正在抽取植物 (樟科植物,富含醣類的一個類群)RNA 實驗步驟與trizol提供的一致 樣本是較年輕的葉片 但是完成步驟後 看不到18s跟28s rRNA的條帶 樣本的lane也沒什麼smear 但是在相對DNA marker 200-300bps之間,卻有一明顯條帶 看起來就像是5s rRNA的位置? 藥品應該沒有問題 我有嘗試抽取其他醣類比較沒那麼多的物種 (唇形科) 28s 18s跟5s都清楚可見 是因為醣類太多? 或有人有類似的問題否? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.127.28.78
huuban:樣本跟reagent不合,抽植物很常碰到的問題 07/01 14:29
huuban:樟科植物尤其難抽,一般kit或reagent無法應付很正常~~ 07/01 14:30
batatas:用CTAB抽? 07/02 21:55
huuban:CTAB應該可以,也可能還是很難抽就是了 07/02 22:55
Onagraceae:我好奇為何只有5s沈澱下來? 07/03 17:49
Onagraceae:我試過了,ctab可以抽,不過有很明顯的DNA殘留 07/03 17:50
huuban:再放DNase吃乾淨就好了 07/04 11:50
WinnieDad:作個RT-PCR一試便知抽RNA結果如何,除非你是要建立cDNA 07/07 12:18
WinnieDad:library,如果只是對少數genes有興趣,這種quality測試 07/07 12:21
WinnieDad:結果我都只當參考而已。 07/07 12:21