推 HEK293:.........= = 07/02 08:41
推 ithinksoiam:本尊出現了XDD 07/02 08:44
我最近要收大量的蛋白質，
這個蛋白質是 secreted protein，
收這個蛋白質主要是要製作 conditioned medium，
以往都是養 HEK293T 在 150 mm dish 中，
然後用 Calcium-phosphate 做 transfection 後再收 medium，
為了讓 medium 中不含有任何 FBS 影響接下來的實驗，
所以都是用 CD 293 medium 來收 protein 的。
這事以前學長姐的 protocol，
但是後來我發現 CD 293 本身是設計來 suspension culture HEK293 的，
所以我想請問板上的各位，
有沒有人有用 CD 293 養 suspension 的 HEK293 的經驗？
我想問的問題主要是：
1. 我的實驗室的 incubator 都沒有 shaker 的功能，
這樣還能養 suspension 的 HEK293 嗎？
2. 板上有人嘗試做過 suspension culture HEK293 cell 來收 protein 的嗎？
請問效果如何呢？
3. 養在 flask 中的話 CD 293 medium 大概可以加到幾分滿？
我是說直立著培養的狀況下......還是說不能直立的養？
感謝各位！
不知道 HEK293 本尊會不會出馬？
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