[求救] 3T3細胞的染色及標定(存活觀察)

[princessyoyo (Be better)]

版上的前輩大家好:

 由於本人念的科系，在生物醫學這一塊的知識幾乎沒有相關

但目前老師出了一個難題，


*把我的材料(凝膠)與3T3細胞混合培養後(1、3天)，去觀察內部細胞是否存活，

若要觀察的話，細胞必須要先標定在和材料下去培養嗎?


本來有預想使用trypan blue去染細胞，但查一查好像沒有人這樣使用

且養三天不知道染劑會不會被medium沖掉




由於只需要知道細胞活or死，所以我查了許多關於細胞染色方面的文獻

但還是不了解適合我使用的方法為哪一種，所以上來求救。


1.免疫螢光染色法

2.螢光標定

3.細胞轉染

我想請問以上提到三種方式，有相同的嗎?或是有什麼差別呢?

3.單一化學染色法



4.這三種方式所染出來的細胞，都需要在螢光顯微鏡觀察嗎?



比較要說是，我由於只需要知道細胞的死亡和存活(類似細胞計數這樣的概念)，

並不需要去分析細胞內部的物質等等，希望能知道一些比較簡便的方式。


非常謝謝大家看完，拜託各位前輩能給我這超級初學者一些建議。

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◆ From: 115.43.43.37
※ 編輯: princessyoyo    來自: 115.43.43.37         (07/21 12:13)
→ formoxa:凝膠可以digestion嗎？
推 puec2:crystal violet
推 chench0710:SRB或是MTT這兩種化學染色法都還滿方便的,只要測吸光值
推 galectin:trypan blue無法在凝膠狀態中染上死細胞，普遍都無法
→ galectin:若是要將你的gel回融可能又會對細胞造成傷害
推 niya1115:推MTT
推 bigcat24:盟基有賣biotium的live/dead assay泡著不用洗可螢光觀察
→ puec2:crystal violet用肉眼就可以看啦 還可以用家用掃描器存檔