推 aceliang:呃...co-transfect不會有promoter competittion嘛?? 07/22 23:11
請教一下，
由於我所使用的 promoter/enhancer 屬於較弱的類型，
之前教我 Luciferase assay 的老師是建議是把我想研究的基因的
promoter/enhancer 接到 pGL3-promoter-vector 上，
利用上面的 SV40 early promoter 增強 ffLuc 的訊號。
現在我遇到一個問題，
如果我懷疑我的實驗操作也有可能會影響到那段 SV40 early promoter，
也因此每做一次實驗我都還要做 pGL3-promoter-vector 的 control。
我想問的是：
我能不能把 pGL3-promoter-vector 上的 ffLuc 換成 rLuc，
用這個 rLuc 當作 internal control 去消除實驗操作對 SV40 early promoter 的影響？
同時 transfect 這兩個有許多相同序列的 plasmid 到細胞內，
會不會影響我的實驗結果？
PS: 原本用的 internal control 是實驗室自己做的用 UbC promoter 表現的 rLuc。
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