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大家好 如果我現在把一條sticky end的產物作為模版 (例如被EcoRI切過) 再拿pfu或其他類似的有proof reading功能的taq進行amplify 理論上我會拿到blunt end的產物 我想問 他成為blunt end 是因為一開始的overhang被pfu taq切掉? 還是因為overhang的另外一股被補起來? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.122.152.136
xxtomnyxx:3' overhang 被切掉,5' 的則是補齊 08/08 13:45
HEK293:到底是pfu還是taq ? 08/08 14:00
Onagraceae:pfu 08/08 14:46
Onagraceae:感謝1f的回覆 08/08 14:49
Ianthegood:amplify是指pcr? p過邊都是primer囉 08/08 23:42
xxtomnyxx:如果只是要把 RE 後的 stick end 補成 blunt,用 08/09 00:01
xxtomnyxx:DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment 就可以了, 08/09 00:02
xxtomnyxx:比 Pfu 或其它 proof-reading 的 polymerase 便宜很多 08/09 00:03