[求救] qPCR使用DNase之疑問

[naruto200420 (賤仔翔)]

發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出

以方便板友幫您追蹤問題

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如題，現在都在做qpcr，抽完的RNA跑膠測完品質就轉cDNA做qPCR

設計的primer都是跨intron的，那還要加DNase在抽完的RNA嗎?

沒加的話期刊會不接受?

要加的話準則是?

感謝各位高手

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.112.230.243
→ storm780121:雖然有跨intron  但是有genome在的話melting curve
→ storm780121:會變不好看嗎?  (我們實驗室都會加  照說明書使用)
→ naruto200420:不會耶@@ 跌得很緊阿
推 BGG:推跑膠看 RNA Quality
→ naruto200420:樓上是指?
→ qiet:沒加+1, 但雖然跨intron還是要小心有些基因會有pseudogene
→ qiet:因為pseudogene可能會缺少intron, 要是有genomic DNA汙染
→ qiet:就可能在做qPCR時被當作template放大影響實驗
→ raylie9093:DNase主要是希望RNA更純 且防止genomic DNA汙染
→ raylie9093:不然抽得好 其實不用加