→ ROKEE:LB一罐沒多少錢啦,浪費的petri dish都不只 09/24 19:16
推 aeroufo:你們有試過在hood倒plate嗎？會不會是你們環境問題? 09/24 19:36
→ aeroufo:因為LB沒長菌，所以應該是在倒plate的過程污染了，我猜 09/24 19:37
→ windyflyer:我們一直是在hood倒盤的~ 09/24 19:46
→ blence:一般的agar plate大概是1.5%,你們以前400變350ml至少濃度會 09/24 19:56
→ blence:增加,現在300ml體積不變的話,agar濃度只有1%.... 09/24 19:57
推 aceliang:1.5% +1，另外自配的話有調pH值嘛？ 09/24 20:31
推 aceliang:另貴實驗室autoclave壓力有到20psi嘛？液體會滾有點怪 09/24 20:40
推 bluesnow1122:PH值吧 會影響到凝固和菌的生長 09/24 23:02
→ nike77114:直接試試看只有Agar看看會不會凝? 09/25 09:46
→ windyflyer:因為一開始用1.5%粉末混濁狀況會更嚴重 加上版上有查到 09/25 10:27
→ windyflyer:1%才改的 以前也是用1.5%+1 09/25 10:27
→ windyflyer:其實自配之前也用過也沒問題 是換了agar之後開始的 09/25 10:27
→ windyflyer:詭異的點在於連換兩家都一樣... 09/25 10:28
→ windyflyer:直接拿去煮ok 可是不知道為啥搭了LB就不行 這兩個分開 09/25 10:28
→ windyflyer:都很好Orz 09/25 10:28
→ windyflyer:我們之前一樣的配方做法都ok 是換了GM的agar開始變這樣 09/25 10:29
→ windyflyer:壓力沒問題 因為拿去隔壁系的也是一樣狀況... 09/25 10:30
→ windyflyer:調pH值唷..以前沒這樣做過._.可以講解一下嘛XD 09/25 10:31
→ HEK293:pH要7-7.4，因為LB裡面沒有buffer，所以pH變動會很劇烈 09/25 10:44
→ HEK293:如果不進autoclave，一般建議是heat plate for an hour 09/25 10:45
→ HEK293:試試先把LB溶好均勻清澈後，再加agar去滅。 09/25 10:46
→ windyflyer:我有試過加熱板先煮 不過大概只有30min滾了我就拿去滅 09/25 11:40
→ windyflyer:了 先溶LB再加agar我會試試看! 09/25 11:40
推 leoblack:400ml滅完會剩350ml,應該是Agar品質差~會突沸而噴出 09/25 12:51
→ leoblack:既然LB broth沒問題,那問題就出在Agar上~用Agar alone試 09/25 12:52
→ leoblack:看光Agar溶於水微波加熱~是否可全溶,又是否會突沸 09/25 12:52
→ windyflyer:喔忘記說 實驗室有人直接拿agar加水去煮是會溶的 不過 09/25 13:06
→ windyflyer:那時候我人不在現場就是了.. 09/25 13:07
推 joseph103331:我們實驗室都是用粉+水 沒溶就去滅 也沒調pH 09/27 23:22
→ joseph103331:都沒甚麼問題 滅完會有一點濁 搖一搖就好了 09/27 23:23