[方法] 3.7% formaldehyde fix 細胞都飄光光

[ron55663 (仁)]

如題

我用3.7% formaldehyde fix 細胞 要做 oil red O 染色

但是每到fix 步驟 細胞都會飄起來 尤其有treat 藥物組別更嚴重

但藥物濃度不能改 有辦法在方法上防止飄起來嗎?

已經超級小心用 pipet一格格慢慢吸慢慢吐了 還是會這樣


請各位大大解

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◆ From: 120.126.38.179
→ puec2:細胞種類？Plate廠牌？
→ puec2:我們實驗室是發現293在corning上貼得很不好
→ ron55663:Huh7 肝癌細胞
推 caesar0926:藥會讓細胞掛掉嗎???
推 williamyang:可以先做coating再culture,看會不會改善.
→ puec2:我們的經驗是293只會從一塊一塊的掉 變成像掀地毯一樣的掉
→ puec2:我的建議是用貴一點的plate試試看
→ puec2:                                    \coating後
→ KerryWood:用4%paraformaldehyde
→ ron55663:4% parformaldehyde 會比較好喔?
推 chaunen:玻片先coating, wash的時候用P200把最前面3mm tip頭剪掉
推 KerryWood:試試看吧 我都用4%parformaldehyde HEK293也不太會飄
→ roy047:4% Paraformaldehyde +1
推 leoblack:4% PFA+1
→ puec2:不過4%放太久有些抗體就會染不到惹
推 leoblack:不論哪種fixation~放太久都不行不是?!
推 puec2:1%我可以放一陣子 :p
→ ron55663:我單純染脂質 沒有要下抗體
推 KerryWood:看染啥東東呀 PFA有時候會破壞某些protein活性
推 chaunen:fix太久不好