→ blence:沒有提到先前樣品來源,含量,偵測方法,及如何偵測BSA的ctrl 11/12 00:54
推 joseph103331:就...把BSA跟你的先前樣品一起loading看大小囉 11/12 02:31
→ joseph103331:然後...樣品來源很重要就是了 11/12 02:32
→ joseph103331:之前的樣品沒有BSA 那怎麼樣也不可能是BSA囉 11/12 02:34
樣品就是細胞，養在含5%FBS的ebm-2培養基裡，再取細胞的時候，
就是直接把培養基抽掉，加入Lysis buffer。然後取Lysate直接跑膠。
BSA 則是溶在水裡後直接加loading buffer，然後跑膠。
因為之前是把BSA加入培養基去刺激Nox1表達，所以老闆覺得有沒有
可能之前偵測到的Nox1都不是真的，都是BSA......然後就直接用BSA
跑膠看看，沒想到還真的偵測到Band。
現在就是直接用老的lysate跟200ng的BSA一起跑，然後用
兩個抗體做看看，也許就只是non-specific binding而已，
只是讓大家很意外，怎麼會BSA也會被Nox1抗體偵測到，兩
個Protein幾乎是不相同的Protein耶，真不知道怎麼解釋......
※ 編輯: brigand 來自: 158.93.6.11 (11/12 04:01)
→ blence:如果細節都不提反倒很好解釋,可是瞎子摸象的答案很沒意義 11/12 04:43
→ blence:像BSA-Ag for pAb,可是留著這種答案,心情不會比較好 11/12 04:59
→ puec2:會不會是BSA量太大造成的non-specific binding? 11/12 12:52
→ puec2:有些抗體連maker都會被壓出來 11/12 12:53
推 icome:BSA超愛亂黏 很正常 11/13 00:09