→ a001ou:你這兩個測定都是螢光讀盤的步驟 螢光顯微鏡不需要破細胞 02/06 00:29
→ a001ou:染完 PBS洗淨後 即可上顯微鏡 02/06 00:30
→ bjuh:我是要螢光讀盤測485nm/520nm的，所以方法1.2都可以嗎? 02/06 00:54
※ 編輯: bjuh 來自: 114.33.46.67 (02/06 01:00)
→ a001ou:都可 02/07 23:30
目前實驗要測ROS
看到的方法有滿多種，分別是flow、Fluorescence Spectrophotometer及fluorescence microscopy
我是要用Fluorescence Spectrophotometer來測
而Fluorescence Spectrophotometer又看到兩種作法，分別是
1.以DCFH-DA染色30分鐘後，PBS洗兩次，TE將細胞切下並離心去除染劑，再用PBS回溶細胞
之後load進96 well plate測定。
及
2.以DCFH-DA染色30分鐘後，PBS洗兩次，之後用RIPA(TritonX100)打破細胞，
直接取細胞液進行測定。
想請問各位先進 以Fluorescence Spectrophotometer測定ROS揪竟需不需要破細胞這個動作呢?
請幫我解惑 非常感謝大家
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