[求救] NEB跟Thermo的RE是可共用buffer

[tigernaxo ()]

手上有NEB的SpeI和fermentas的HindIII  (都是普通版本，非FD、非HF)
現在要做double digestion，但是RE的廠牌不同...
我查fermentas的SpeI用Tango buffer可以有100%活性
如果用NEB的SpeI加進Tango buffer，和HindIII一起切，這樣行得通嗎？
由於實驗室窮到爆炸，買enzyme應該是下下策，求有經驗的前輩幫忙解惑...

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◆ From: 60.251.145.32
→ blence:你的第3行,NEB的HindIII在buffer2也有100%,不也可以反過來?
→ blence:通常結論都會是"分開切",不過如果要試,SpeI在buffer2是100%
這實驗室gel elute kit剩下的數量...不容許我做這件事  ...
→ blence:而且F的HindIII在R(tango反而不好)是100%,R與2是最靠近的
沒NEB 2，只有Cutsmart buffer(4+BSA的版本)(整間實驗室只有一支NEB的enzyme...)
別的實驗室很遙遠，借buffer來回要兩小時...所以先考慮Fermentas的去弄
而且HIndIII很便宜，-20C裡面還有不少，所以才會想以配合SpeI為主
→ blence:不過實驗室真的有經費考量,還是別亂試比較保險
→ xxtomnyxx:我以前實驗室是 NEB 和 Roche，基本上是相容的。
→ xxtomnyxx:NEB 有提供 Buffer 的配方，如果 Thermo 也有提供，你可
→ xxtomnyxx:以去比對看配方是不是類似的，如果是類似的當然可以共用
→ xxtomnyxx:如果你想保險起見，就先拿少量做個測試吧！
謝謝，我先試少量跑膠看看好了
※ 編輯: tigernaxo       來自: 60.251.145.32        (03/14 14:15)