[求救] C2C12 細胞做 MTT assay

[xxtomnyxx (翼天)]

實驗室要使用 C2C12 細胞測試藥物對細胞的毒性，
我該使用未分化還是分化後的 C2C12 細胞呢？
我想問一下板上有做藥物毒性的人的意見。

另外，
若是使用分化後的細胞，
我是在 24 well 種細胞並使其分化的，
分化完成後基本上細胞是整個長滿的狀態，
我試了一次用這樣的細胞測 MTT，
但是 MTT 放 2 小時後紫色結晶就爆表了，
我想到的可能解決方法有：
1. 減少 MTT 反應時間 (測試時為 2 小時)
2. 增加溶解 MTT 所使用的 DMSO 量 (測試時 24 well 用 400 ul)
3. 減少在 96 讀盤上的樣本體積 (測試時用 200 ul)

如果對上述條件做調整，
在 MTT assay 上會有什麼風險嗎？


感謝各位！

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.79.173.201
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※ 編輯: xxtomnyxx (42.79.173.201), 06/04/2014 08:41:36
→ angioadsc:你知道這藥物大概的藥性嗎？你知道為何要加這藥嗎？初始
→ angioadsc:細胞數會不會太多？
→ angioadsc:C2C12分化為肌肉細胞必須養滿,MTT自然暴錶
→ mars52013146:c2c12要養到分化才具功能性吧
藥物作用的對象目標是肌肉細胞，
所以應該是要使用分化後的 C2C12 細胞進行實驗，
我看到有篇 short report 也是用分化後的 C2C12 做 MTT，
但是他測量的波長是用 490nm。

資料來源：
http://ppt.cc/rWut

我先試試用 490nm 測量看看好了。
※ 編輯: xxtomnyxx (42.79.17.222), 06/05/2014 14:48:50