推 jabari:用quick & dirty傳統法再用kit淨化呢?? 06/13 23:09
推 silverberry:感謝 p 大~ 兩個女生在實驗室 overnight 真是一點也不 07/17 10:16
→ silverberry:浪漫 @ @ 我會注意一下 culture 的時間! 感謝~ 07/17 10:17
※ 引述《silverberry (平行線上的交集....)》之銘言：
: 最近新手上路 lentivirus transfection 做 iPS
: 接到的第一個任務是準備 packing 用的載體 psPAX2 和 pMD2.G
: https://www.addgene.org/mammalianrnai/Packaging/
: 2nd generation system deposited by the Trono lab
: 實驗室的學妹之前純化這兩個載體，
: 是從 -80 glycerol cell stock (stbl3 strain) 養小量 0.5 mL 半天，
: 然後傍晚放大到 200 mL overnight 到隔天，
有可能是你養過頭啦
養過頭plasmid的產量就會變得很少。你可以試試看養在室溫overnight
或者傍晚養在37度，凌晨3~4點跟學妹一起抽plasmid。>//////<
以前我曾經因為這樣用光一整盒midiprep 還找specialist一起抓原因
也是小量抽沒問題，但是放overnight就抽不出東西..還因此換了兩三
盒新的midi-prep..
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