推 biingru: 小魯我以前就是用上面兩種硬算的 讚 08/25 10:31
推 chaunen: 我用final 0.2uM 可以mutant成功 08/27 13:42
※ 引述《jernie (jernie)》之銘言：
: ※ 引述《jernie (jernie)》之銘言：
: : 不好意思! 問個蠢問題
: : 如果買來的primer用245ul ddH20 溶解 Final stock 是100mM
: : 若用165ul ddH20 溶解 Final stock 是165ug/ul
: : Primer 的mw 6490
: : 但是最近要做site-directed mutagenesis, protocol上的primer是1.25 μl (125 ng)
: : of oligonucleotide control prime , 請問要怎麼計算?
: : (以上數據是假設的,因為primer還沒來)
: Primer 100mM要如何换算成125ng
: (1.25ng/ul)
照你給的條件
我給兩個算法
算法一 高中化學法
100mM = 0.1 M = 0.1 mol/L = (6490 * 0.1) g/L
125 nG = 1.25 * 10^-7 g = V * 649 g/L
V = [(1.25 * 10^-7) / 649] L = (1.25*10^-1)/649 / uL
= 0.000192 uL
算法二 目標濃度換算(ref. Stratagene quikchange manual p.6)
X (pmole) = 125/6490 * 1000 = 19.3 pmole
V * 100mM = 19.3 pmole
V = (19.3/100) pmole/mM = 0.000193 uL
不過一般我們primer stock都是回溶成100uM
不知道你為什麼會訂到這麼大量 是一般人的1000倍
下面開放戰ip
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