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引用搜尋到2012年版友的疑問 目前有在用B16-F10做實驗 也是想要做原料是否具有美白效果的評估 目前已嘗試到: seeding 1*10^5 cells/ml in 24-well (high glucose DMEM+10% FBS)--> 用100nM、500nM、1uM等劑量的α-MSH(stock溶於水)刺激3天--> PBS wash後每well加100ul含10% DMSO的1N NaOH溶液@60度C 1小時破細胞--> 最後量405nm的吸光值 但不管有無加α-MSH,吸光值都很低阿!!(低於0.1) 肉眼看是有點顏色 但非常淡 不知道是否有先進能提供寶貴意見呢? 感謝orz ※ 引述《ben00691206 (Ben)》之銘言: : α-MSH是能夠刺激黑色素細胞產生黑色素的hormone : 而很多篇paper都只用100 nM就可以induce B16細胞的黑色素生成至少2倍以上 : 但我在實驗室用0.5μM treat B16細胞無法induce,甚至用到15μM一樣看不到明顯的黑 : 色素生成(24小時收) : 想請問一下這是為什麼 : 是不是α-MSH壞掉還是細胞敏感度的問題? : 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.34.191.172 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1414393562.A.EF7.html ※ 編輯: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:19:21 ※ 編輯: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:19:57 ※ 編輯: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:27:47
ab90377: 我們做法細胞是1*10^7培養ㄧ天後再加a-MSH 10nM ,16小 01/02 00:01
ab90377: 時後就收細胞, 你收細胞的做法可以改變ㄧ下,我們測到 01/02 00:01
ab90377: 的OD至少都有0.5 01/02 00:01