[求救] seeding 96-well/ATPlite 高手

[chenmick ()]

我要把細胞種在96-well plate,加藥後用ATPlite測細胞存活率

但是error bars都超大,在想是因為細胞不均勻還是ATPlite沒做好:

1.細胞調完濃度後倒到dish,用八爪吸200ul加到96-well

但細胞都會聚集在well的邊邊,well中間的細胞都比較少,

請問seed的時候有什麼要特別注意的嗎?

定點加or繞著圓圈加? 慢慢加or快快加? 加玩搖一搖or靜置10~15min?

2.在加完ATPlite的的試劑後都會產生很多泡泡,請問這些泡泡影響儀器偵測冷光嗎?

感恩~

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 203.71.94.11
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→ blence: 看描述,種到96well沒有至少放置o/n讓cell貼附？
→ blence: 96well很好分的,沿壁面正常速度加入,不必搖就很均勻
→ blence: 另外96well裝到200ul,離溢滿的高度應該不遠了
→ chenmick: 有讓細胞貼o/n,隔天才加藥 sorry
→ raiyu: 2泡泡會影響
→ raiyu: 雖然我覺得你的誤差大是因為泡泡跟細胞是不是在well邊無關
→ raiyu: 但可以 試改成loading 100ul
→ moon0126: 濃度調100-150ul/well,吸過量在加到well