[求救] Real-time PCR的PCR efficiency~

[hsin37 (因禍得福???)]

想請問大家，

做Relative quantification的real-time PCR前

都會先確認PCR efficiency嗎?

查的文獻說一定要統一PCR efficiency

做出來的數據才有意義....

可是我們老師認為沒有做的必要，

沒有人在做....問了隔壁研究室的前輩，

也說他們實驗室也沒有人在確認這個的，

請問大家的實驗室也不會確認嗎?

這樣做出來的DATA發表paper的話，會不會有問題呢?

謝謝回答^^

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※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1416483453.A.516.html
推 qiet: 很多人都沒有做, 但建議可以測試一下較安心
→ skyken10: http://www.rdml.org/clinchem.2008.112797v1.pdf 參考
→ skyken10: 一下這篇paper，你就會知道需不需要做了！
推 liuse: 你不做要怎麼算之後的data  都當成double per cycle?
推 svc1213: 投稿時 ，曾經被問過 。
→ WinnieDad: 的確不少researchers和publications就直接假設是2了…
推 LeonPPK: 可以加做一個standard curve就可以確認了
推 jabari: 你有幾個gene要測?大於4個的話直接改算相對表現量改變
→ jabari: 反正你有放control 又有house keeping 多於4個基因還作eff
→ jabari: 只會殺了自己尤其是(真)standard curve是算copy number的
→ jabari: 打太快 是改用'進階'相對表現量改變 就是有個對照基本樣品
推 gps0110: 借這篇問一下 如果用ddCt法做relative quantification的
→ gps0110: 話 需要每盤都有housekeeping gene嗎？sample很多 一盤
→ gps0110: 放不下 每盤都要housekeeping gene的話要做的量一下子多
→ gps0110: 好多