大家好，我已經卡在JC-1很久了
也找非常多protocol 但作法太多種
還請各位幫忙


6well，螢光顯微鏡（非flow)

是癌細胞 處理藥物24小時，去除含藥medium，以PBS  wash  2次，然後每well加入1c.c
與培養時一樣的含FBS血清 medium ，每個well 加入10ug /1ml，培養30分鐘，冷PBS清洗
兩次，甲醇固定15分鐘，DAPI染核15分鐘，螢光顯微鏡拍照

結果，什麼都沒有  只有DAPI發光



還有幾個問題！


1.  染JC-1時，Medium有沒有含FBS重要嗎？
     要用PBS還是medium？

2.  JC-1 加到well  好多漂浮物，搖不開

3.每次避光的細節都有注意，但最後擠個well都會越來越暗


謝謝大家


※ 編輯: dawnga (49.216.40.152 臺灣), 04/02/2020 00:58:59
推 shelix: jc-1好像只能看living cell? 看abcam的介紹
推 shinink: JC1只能活染 而且JC1很難溶 建議先跟medium混合均勻再加
→ shinink:  之前也有做過相同實驗 但是DAPI活染效果不好
→ Barolo: 你要看什麼東西? JC1不是拿來染粒線體膜電位的?
→ Barolo: 還是你只是要染ER？ 很難溶+1
推 cjsntu: 有沒有含FBS其實不太重要，如果要用螢光顯微鏡看建議加到w
→ cjsntu: ell以前可以用.22過濾，這樣顆粒會比較少。
→ cjsntu: 會越來越暗的話，有考慮mounting medium加antifade封起來
→ cjsntu: 嗎？
推 chengeric: 溶解度不好的話,可以考慮用JC-10