跑膠的問題

[goodman1 (撰寫國王的論文ing)]

我是用2%的agarose跑ssDNA

有時候會很不幸的出現整條都是smear 囧rz

請問要怎麼避免掉smear的出現啊

問題是出在PCR的過程還是跑電泳的過程？（還是製膠的過程？）

<(_ _)> 剛溫

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◆ From: 163.15.161.237
推 sGoat:PCR...GEL不太可能有問題...
推 zoom8080:有一批Gel好便宜阿...
→ goodman1:所以是哪裡的問題？＠＠？
推 sGoat:primer TM值沒橋好...primer dimer太多...
推 sGoat:看錯...sample跑膠前加熱denature一下怎樣...
推 Anvec:有沒有可能是第三步驟extension的時間不夠?
→ Anvec:有的人會把annealing跟 extension 合併
→ Anvec:但是如果 template的length > 250bp 就會來不及聚合反應
推 sGoat:它的是ssDNA跑膠...你可以試試用acrylamide跑看看..
→ sGoat:可能是解析度不夠吧...阿災...
推 goodman1:心虛問一下，因為有時候有出來有時候沒出來
→ goodman1:如果純技術問題的話會是哪裡出問題啊 ＠＠
→ goodman1:我已經盡量每次loading時都很專心了
→ goodman1:我說錯了，應該是跑dsDNA ><" 對不起