作者sGoat (無三小羚羊)
看板CSMU-LS89
標題Re: 不好意思我又來問問題了 <囧
時間Sat Apr 8 18:51:29 2006
※ 引述《yitingg (婷)》之銘言：
: ※ 引述《goodman1 (帥哥皮 好人骨)》之銘言：
: : <囧
: 1.先用第一對primer進行PCR
: →
: ==========================================================
: ←
: 預定檢視的片段
: 第一次PCR所得產物直接以第二對primer進行第二次PCR
: →
: ==============================================
: ←
: 經由兩次PCR放大的結果,其DNA量才足夠進行其他實驗
: 現在做methylation的人,通常會使用nested PCR了
: 因為真的沒做就看不到啦~~~~~
其實nest還有分...
你可以用一對或是兩對primer做nest...
用一對做的意義是如同上述的放大產物量...
用兩對做的意義是產物更專一性...
(因為第一次的產物若可以被第二對primer擴增出來,即代表是同一段序列)
用兩對的方法常在RACE的kit中看到...
以上補充...
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.130.14
推 goodman1:不懂 ＠＠ 逸婷說的放大產量不是也是兩對PRIMER嗎？ 04/09 10:09
推 goodman1:還有突然想到第二個問題，multiplex PCR跟nest PCR一樣嗎 04/09 11:35
推 sGoat:第二個問題..nest是另外又做一次PCR,mu是加在一起做一次... 04/09 15:57
→ sGoat:第一個問題...一對primer做兩次也可以放大..但兩對較專一... 04/09 15:59
推 goodman1:嗯嗯 謝謝 ^^ 那做兩對是不是就可以放大兼增加專一性? 04/09 22:07
→ goodman1:摸剌仔兼洗褲 是這樣嗎? ^^" 04/09 22:08
推 sGoat:是的 04/10 14:39
推 goodman1:謝謝 <(_ _)> 太感動了，中興也要一份肯德基嗎？ XD 04/10 15:30
推 sGoat:免了吧XDXD 04/10 15:48