作者goodman1 (帥哥皮 好人骨)
看板CSMU-LS89
標題我又來問問題囉
時間Tue Apr 18 19:05:27 2006
嗯嗯，想問個Southern blot的問題 ^^"
就是在paper上他是要看同一個基因的甲基化情形
他先用甲基化敏感的酵素SmaI去切genomic DNA
overnight後再用PstI再切一次再overnight
然後用agarose gel跑電泳再transfer到Hybond N+ membrane
用random primed method用[阿法三十二P ]dCTP-labelled fragment去黏
再用一些我看不懂的鬼overnight以後用機器去看band
重點來了
他說Probes were made by PCR. 然後附了幾組primer
嗯嗯嗯
我的問題是
「Southern blot的probe是用PCR作的喔？」＠＠？
我以為Southern blot要作PCR是因為一開始的DNA量不夠耶 Orz
以上，謝謝大家 QQ
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正妹對男生的三種反應
好人 帥哥 宅男
嗯嗯 好無聊喔 (離線)
我去洗澡囉 ^^ 我去打扮一下待會見 ^^ （離線）
明天可以請你幫我修電腦嗎^^ 明天我爸媽不在家 ^^ （離線）
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◆ From: 163.15.161.237
推 sGoat:probe可以用pcr去p,或是RE去切plasmid的方式來做... 04/19 00:33
→ sGoat:但是這跟你說的southern要做PCR是兩件事...了嗎? 04/19 00:34
推 goodman1:你的意思是還是有需要PCR放大DNA量的步驟嗎?@@? 04/19 10:38
推 recombinase:兩件事情 做probe 是第一件事情 04/19 11:30
→ recombinase:transfer 的DNA 是另外一組 最後兩組加起來 04/19 11:31
推 sGoat:三樓的你得到他了...不過PCR放大DNA量是訊號太弱時才做... 04/19 13:20
→ sGoat:非必要.... 04/19 13:21