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我先把文字檔PO上來 另外再上傳醫學系93級的生化檔案櫃 (黃志揚老師P44~P49) 禮拜二普社考試會補發給大家 剩下的會放在系櫃 沒有考普社的同學就請其他人幫忙拿一下 造成大家的不便 不好意思 P.44&45&46 DNA的雙股螺旋結構 1. 1953年由華生與克立克發表DNA的雙股螺旋結構(B form)。 2. 後代用X-ray繞射證明出DNA有A、B、C、D、E、Z六種形式,其中Z form是最矮最胖的。 3. 寬度為20A。;一個turn為34A。,含有10個鹼基對(base pair=bp)。 4. 一個turn裡包含一個小凹槽和一個大凹槽,目的是讓特定蛋白質(轉錄因子)可以插入 ,進而將雙股的DNA拉開。 5. A=T以二氫鍵鍵結,C≡G以三氫鍵鍵結,故C≡G鍵結為A=T鍵結強度的1.5倍。此種生 理意義在於:A=T鍵結較弱,轉錄因子可從A=T較多的地方把DNA拉開。 6. 含有兩股,分別是5'→3'、3'→5',稱為反平行。 DNA的Denaturation 1. 要將DNA的雙股分開,首先要先經過加溫的步驟。而讓DNA熔解到一半的溫度,稱為 melting temperature,簡寫為Tm。 2. C≡G多的DNA比A=T多的DNA需要更高的溫度,因為C≡G含有三氫鍵。 3. Tm的大小決定於兩因素:鹼基的組成與鹽的濃度。 4. 鹽的濃度越高,所需濃度也越高,原因在於鹽溶液中的Na+、K+會吸附在鹼基的周圍, 而讓鹼基較穩定。通常鹽濃度增加10倍,Tm要增加16.6。C。 5. Denaturation的步驟 ○1降低鹽濃度、增加Tm→DNA熔解→ ○2鹼基暴露→ ○3雙鍵吸收光線(hyperchremicity高吸光性)→ ○4失去黏稠性 6. B form的旋轉方式為向右後方旋轉(逆時鐘),稱為negative supercoil(負超螺旋)。 將來需透過isomerase(拓樸?)才能將其拉開。 p.47&48&49 DNA的複製 1. 雙股都是模板股,並且都以3'→5'為template,從5'→3'合成新股。 2. 半保留型複製。 3. 複製的時候,從A=T含量多的地方拉開。不同的基因,其拉開的位置不一樣,序列也 不同;但相同的是,都富含A=T。 4. 圖37-5為半保留型複製的證明。圖中黑色曲線為14N,白色曲線為15N。 (1)用含有14N的培養基培養大腸桿菌,細菌在此培養基中繁殖很多代之後,其DNA所含的 N皆為14N。 (2)將這種細菌放在含有15N的培養基上,經過第一次分裂,其第一子代的DNA中含有 一半的14N一半的15N。 (3)再經過第二次分裂,有一半的第二子代的DNA都是含15N;而另一半的第二子代,其 DNA的一股含14N,另一股則含15N。 DNA複製與轉錄的比較 DNA複製 轉錄 使用的核?酸 dATP、dTTP、dCTP、aGTP ATP、UTP、CTP、GTP Template strand 兩股皆可當模板股 3'→5' Coding strand 無 5'→3' 核?酸的比例 A=T、C=G,A/T=1、C/G=1 A≠T、C≠G,A/T≠1、C/G≠1 DNA與RNA的比較 DNA RNA 五碳糖種類 去氧核糖 核糖 鹼基組成 A、T、C、G A、U、C、G Strand的數目 雙股 單股(但RNA仍有部分形成內部雙股的情形) A/T,C/G比例 A/T=1,C/G=1 A/T≠1、C/G≠1 特性 僵硬、黏稠 遇酸易水解 BY 乙班生化學藝 志鈞 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.126.17.115