推 ckriley:謝謝助教指點,我還是太弱了...... 11/24 21:19
推 CieloCot:推簡單題目背後蘊含著大道理:P 11/25 00:16
這一題看似簡單
其實很多人搞混 positive / negative control 的意義
positive control 是要確定真的可以經由轉型讓你的 DAK2 cells 能抗 Ampicillin
negative control 是要確認只加入 ligation buffer 後的 DAK2 cells
是不是仍為 AmpS
嘿嘿
有些人把 control 寫成:
將 JAF1 cells 培養以後 塗在 ampicillin gel 上
然後看看會不會有菌落
或是將 DAK2 cells 的 plasmid 轉型到 JAF1 cells 後培養
然後看看會不會有菌落
要想想看 我的問題是要確定 ampr 是在 JAF1 的質體還是染色體
DAK2 cells 的勝任細胞是拿來當轉型的對象
記住 你的 control 一次只能改一個變因
還有實驗設計要簡單 而且要用現有的材料
另外
還有人以為勝任細胞沒有 plasmid
其實勝任細胞只是用氯化鈣處理過
質體還在阿
還有人將 JAF1 細胞和 DAK2 勝任細胞加在一起
這樣不會轉型啦 而且你就無法分離出 DAK2 了
還有人沒寫清楚是要transform 到 DAK2 還是 DAK2 勝任細胞
哈哈 一個題目 短短不到十行 竟然有那麼多細節
大家應該能知道我的用心良苦吧
一個好的題目 理應題目跟答案都很精簡
但是 背後卻蘊含了大道理
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