[問題] 關於RAW264.7細胞暴露問題

[weting69 (其實我要的很簡單)]

我想請教各位關於細胞暴露的問題,

我的實驗是將微粒暴露到RAW264.7細胞,

然後用ELISA kit測TNF-a,

但問題是control組(暴露PBS)的TNF-a釋放量一直都很高(800 pg/ml以上),



我試過很多條件都沒辦法解決...

包括seeding的細胞數和時間，

也換過細胞株，換過medium配方，

ELISA standard curve沒問題，

現在細胞看起來是圓圓亮亮的，

我已經想不到可能出現問題的地方了，

想請教有類似經驗的各位幫我想想




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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.116.94.75
推 umijuki:RAW是很敏感的細胞，血清用的是endotoxin-free的嗎?
→ umijuki:不是的話就可能是血清造成的囉
推 missoul:不要用抗生素 確認是否有汙染 包括mycoplasm
推 lifen:重新養一批新的 此外你的器具很容易有LPS之類污染的問題
推 nkj21505:control要用PBS嗎?不能用medium?生長環境變~會刺激分泌