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http://www.ceps.com.tw/ec/ecjnlarticleView.aspx?jnlcattype=1&jnlptype=5&jnltype=43&jnliid=738&issueiid=7398&atliid=83613 聚半乳糖醛酸酶 (polygalacturonase, PG) 可能為根瘤菌與豆科植物根部進行共生固氮 作用時,根瘤菌分解植物細胞壁的關鍵酵素。利用聚半乳糖醛酸(polygalacturonic acid) 當作基質,經PG作用五小時後,以BCA(2,2'-bicinchonic acid) 溶液測定反應液 中顏色變化 (570nm) 定量酵素活性。本試驗以Sinorhizobium fredii CCRC 15769作為研 究PG的菌株,嘗試以多種碳源誘導培養,並添加類黃酮誘導,以提高PG的產量。結果顯示 ,以myo-inositol為碳源可以得到較高的PG活性;而添加果膠、naringenin、DHF並不能 對於PG活性有明顯的提升,genistein則具有提升活性的效果。菌體培養後經超音波破菌 得到的粗酵素液,其作用最適pH為5.5,最適溫度為35℃。粗酵素液經硫酸銨劃分後,收 集飽和濃度40-60%之沈澱,以20mM NaOAc緩衝液透析,離心後上清液通入Phenyl Sepharose 6之疏水性管柱,收取活性部分後透析,並繼續通入DEAE Spharose陰離子交換 管柱,層析後收集具有活性的分劃,最後比活性(U/mg)為0.152,純化倍率為52.5,回收 率為0.04%。 -- 人類之所以偉大,正在於他是一座橋樑而非目的; 人類之所以可愛,正在於他是一段跨越與完成。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 124.8.129.242