http://www.agrionline.net.cn/keji/lunwenzy/shuoshi/25.htm
中文摘要：以玉米（Zea mays L.）幼胚誘導的愈傷組織為轉化受體，用基因槍轟擊的方
法將含有編碼高賴氨酸蛋白的cDNA（SB401）和hpt基因的質粒p35/35SKH（35/35S啟動子
）和p19ZKH（19Z啟動子）導入玉米，分子檢測的結果表明在109株再生植株中，44株為轉
基因植株（35/35S：18株；19Z：26株），可育的20株（35/35S：11株；19Z：9株）。轉
化率在3%以上。Southern雜交結果表明外源基因已遺傳至R1和R2代，其中R1代植株中帶有
外源基因的占74%，符合孟德爾分離規律（分離比為3：1）。R1、R2代植株的形態和農藝
性狀都沒有出現異常。Northern和Western的結果表明外源基因在R1代植株的種子中進行
了轉錄和翻譯。測定了R1代成熟種子中賴氨酸和總蛋白含量，表明有14株的賴氨酸含量提
高10%以上，33株總蛋白提高10%以上。其中在90-4號（轉p19ZKH）R1植株的成熟種子中，
SB401蛋白的積累水平達到了種子水溶性蛋白的2.5%，賴氨酸含量和種子總蛋白的含量分
別為0.48g/100g種子（對照組為0.31g/100g種子）和15.04g/100g種子（對照組為
10.82g/100g種子），分別提高了54.8%和39%。Northern雜交分析的結果表明，在34-5（1
個拷貝）、90-4（2個拷貝）、88-2（3個拷貝）這3個不同拷貝數的純合R1株系的幼嫩種
子中（14DAP），90-4的mRNA積累水平最高，34-5次之，88-2最低；在34號R0植株（1個拷
貝）的3個純合R1株系34-1、34-3、34-5的幼嫩種子中（14DAP），mRNA的積累水平出現了
明顯差異。以上結果表明外源基因的表達水平與基因的拷貝數可能沒有相關性。在我們的
實驗條件下，沒有發現SB401蛋白在玉米胚乳中的積累對種子的生長發育有任何影響，因
此它可以用於提高玉米種子中賴氨酸含量的基因工程，改良玉米營養品質。
關鍵詞：玉米；高賴氨酸；品質改良；表達水平；拷貝數
--
緩慢......
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 124.8.131.190