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HPLC液相層析
HPLC分析方法是在1980年代從管柱層析方法所發展出來的，因為發現管柱內的固定相的顆
粒如變小則其解析度會提高而發展開的方法。其結果是使用更細的材質(3-10um)用在HPLC
的分析而取代傳統管柱(120-200um) 的分析，從此HPLC成為實驗室常用的分析方法。
HPLC設備包含：pump 壓力達360 bar，樣品注入系統，分離管柱，流洗媒介，信號記錄器
，偵測器，信號轉換器，樣品分液收集器。管柱長度通常為 125 mm或250mm，內徑為 4
mm，內充填矽膠或類似多孔狀材質，25公分長的管柱其理論板數可達5000，除使用經以官
能基修飾的極性silica gel之外，非極性(reversed phase)的固定相也被使用(RP-HPLC)
。
流動相可以使用簡單的單一溶劑或以幾種溶劑固定比例混合的溶劑稱為Isocratica。但一
些比較困難分離的樣品，往往需要梯度流洗(gradient elution)，由二種或三種溶劑(如
acetonitrile及water 或methanol及water)藉由梯度混合馬達連結來控制其梯度條件。整
個系統通常由電腦或微處理機控制，連計算功能也可包含。重要的參數有dead time(無法
被靜相滯留的化合物通過管柱的時間)，net retention time (淨滯留時間)，resulting
total retention time(完成分析之總滯留時間)，由波峰面積定量，由於UV detector
(UV偵測器)簡易處理的優點所以常被使用在HPLC上，當然還有其他偵測器如RI(折射計)，
fluorescence(螢光)， conductivity(電導度)等。
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