我懶得重打 又忘了轉到WORK版^^"
大家委屈一下吧~~:P

作者: afa (我是可愛的馬鈴薯) 看板: NTUAC92
標題: 大家看看吧
時間: Sun Jan 11 01:09:08 2004

※ [本文轉錄自 NTUBST92 看板]

作者: afa (我是可愛的馬鈴薯) 看板: NTUBST92
標題: 通緝清河!!
時間: Sun Jan 11 01:02:25 2004

抱歉..借用系版一下^^"
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清河 假如你還在線上的話...
你可不可以幫我看一下這個..
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Direct sequencing的目的如下..
為了要了解無法在實驗室中培養的細菌，利用此技術配合演化樹，尋找此種細菌
與目前已知的哪些細菌相似..
[稍微翻一下而已啦..有一點錯的話不要太計較^^"]

Direct sequencing的流程如下..
1.從土壤或水中取sample
2.將細胞溶解&作DNA purify
3.用"廣泛的"(universe)rRNA基因的primer 將purify後的DNA作PCR
4.將PCR後的DNA purify後並分類
5.將分類後的DNA分別注入E.Coli中
6.待E.Coli大量繁殖後 取出plasmid再跑電泳

問題如下..
1.第4步時的purify是不是要將製造rRNA基因特別分離出來?不然為什麼要再purify一次..?
[我真的忘了耶..PCR後要再作一次purify嗎?]

2.為什麼要特別將這段DNA放入E.Coli裡面??用意是什麼??
  假如只是要放大DNA的話..直接用PCR跑就好啦 跑多久就有多少..
  是因為PCR的錯誤率高?[好像有聽說過這件事..但是我不確定..>"<]

我想了很久耶..>"< 可是還是不會><"
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purify應該是一定要的..因為要把雜質弄掉..我後來才想起來..
[我們做完PCR應該有做purify吧..我真的忘了..||]

第二個問題呢..強者董認為PCR的確錯誤率比較高
不知你有什麼看法??
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歡迎大家一起討論~~

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I'm just a small potato.

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.203.62.27

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◆ From: 203.203.62.27
※ 編輯: afa             來自: 203.203.62.27        (01/11 01:10)
※ 編輯: afa             來自: 203.203.62.27        (01/11 01:10)