推 stzz:淚推煥基T_T 06/10 18:30
推 peaceway:TAT 06/10 18:49
推 mollyran:那個...Proteus vulgaris應該會產生硫化氫喔 (辛苦了~) 06/10 21:29
推 Bebothnd:認真推 這算作弊嗎XD? 06/10 23:07
推 f4faa:推!!煥基強喔!! 06/10 23:45
未知菌種的鑑定
a. TSI agar slant (P59)
功能:1.辨別微生物醣類發酵的差異2.產生H2S的能力
分斜面及底部
只用glucose---迳底部酸性(黃色)
---迳斜面鹼性(橘紅色)
能用乳糖或蔗糖-迳斜面and底部均酸性(黃色)
不用任何糖-迳均鹼性(橘紅色)
能生成H2S-迳底部有黑色硫化亞鐵沉澱
菌種們: (都是plate)
Escherichia coli大腸桿菌
E.coli 底部呈紅色，斜面呈黃色。(有點怪) 不能生成H2S。
Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌
全部都呈現紅色，因此不會利用葡萄糖、乳糖和蔗糖。不能生成H2S。
Shigella flexneri 志賀氏桿菌
全部都呈現紅色，不會利用葡萄糖、乳糖和蔗糖。
(煥基看到的是:斜面紅色、底部黃色。我認為其只利用葡萄糖。也是不能生H2S)
Salmonella Typhimurium 沙門氏鼠傷寒桿菌
會產生H2S(底部有黑色硫化亞鐵沉澱)。
不會利用葡萄糖、乳糖、蔗糖。均鹼性(橘紅色)
Alcaligenes faecalis: 糞產堿菌
底部呈紅色，斜面呈黃色。(怪怪的)。不能生成H2S。
Proteus vulgaris 普通變型桿菌
全部都呈現黃色，
會利用乳糖和蔗糖，但不會產生H2S。
b. Litmus milk石蕊乳試驗 (p64)
功能:了解微生物1.乳酸發酵2.產氣3.石蕊的還原反應4.乳凝塊形成5.蛋白質分解6.鹼反
應
1.乳糖發酵:乳糖 (紫色) 迳 葡萄糖+半乳糖 迳 乳酸(粉紅色)
2.氣體的產生:細菌發酵乳糖最終產物有時是CO2或H2 在牛乳培養基中，牛乳因酸變
成固體，若有氣體產生可看到固態牛乳撕裂產生空隙。
3.石蕊的還原反應:
若無氧當氫離子接收者
石蕊(紫色)迳無色OR牛乳色
4.乳凝塊形成
硬性凝塊
軟性凝塊(細菌產生凝乳酵素)
5.水解蛋白質及鹼性反應
細菌水解牛乳內蛋白質-迳培養基呈鹼性迳石蕊指示劑呈現深紫色
AND培養基乳漿狀
菌種們:
Escherichia coli大腸桿菌(P59)
呈淡粉紅色，因此E.coli 可以進行乳糖發酵，而且有硬性凝塊產生，
Alcaligenes faecalis: 糞產堿菌(P59)
紫色
Lactococcus lactis ATCC 11454
其他組別的L.lactis ATCC 11454 都有出現明顯顏色變
化和凝塊出現，應該是我們的L.lactis ATCC 11454 沒有接種成功。(怪怪的)
Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌(P59)
紫色
C.SIM deep(p67，p61)
功能:1.測定微生物分解tryptophan的能力(藉由indole和Kovac試劑的反應)
如果上層呈紅色迳 indole-positive
2.測定微生物產生H2S的能力，和微生物在SIM培養基的mobility。
菌種們:(都是plate)
Enterobacter aerogenes 產氣腸桿菌
不會產生硫化氫，而且不具有運動性。
不可分解tryptophan(上層沒紅色)
Salmonella Typhimurium 沙門氏鼠傷寒桿菌 ( p59)
會產生硫化氫，而且具有運動性。(沒有做indole試驗)
Klebsiella pneumonia 克雷白氏肺炎菌
不會產生硫化氫，但具有一點點運動性。
--------------------------實驗二十六
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Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64)
可分解tryptophan(上層呈紅色) 不具運動性
Proteus vulgaris 普通變型桿菌(p59)
可分解tryptophan(上層呈紅色)
具運動性
Enterobacter aerogenes 產氣腸桿菌(上面就有了)
不可分解tryptophan(上層無紅色) 不具運動性
D.Tryptic nitrate broth (p71)
功能:測試微生物還原nitrate的能力
NO3- + 2H+ + 2e- NO2- +H2O
Nitrate 還原 Nitrite+(reagent A and reagent B變紅色)
有些細菌會把NO2-變成 N2 (無色)
NO3- N2 都是無色傻傻分不清楚故加入Zn(請記住是加到無色的試管喔)
加入Zn後變紅色，代表此細菌無法還原NO3- 陰性
若加入Zn後無色，代表此細菌可以還原NO3- 陽性
細菌們:(都是plate)
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61)
E.coli 加入solution 後的結果，變成紅色，表示E.coli 可以將nitrate
還原成nitrite。
Alcaligenes faecalis: 糞產堿菌(P59 64)
一開始加入reagent A and reagent B呈無色，加入Zn後呈紅色表示
牠是陰性。
Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌(P59 64)
一開始加入reagent A and reagent B呈無色，加入Zn後仍呈無色，表示P.aeruginosa 可
將nitrate 還原成氮氣。
E .MR-VP broth(p68)
功能:測定微生物氧化葡萄糖而產酸的能力
E.coli將葡萄糖分解產生酸-----迳甲基紅呈紅色(陽性)
E.aerogenes會繼續將此酸性產物分解成非酸性產物---迳甲基紅呈黃色(陰性)+Barritt’
s試劑-迳變紅色
細菌們:(都是plate)
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61 71)
E.coli，
Methyl red test 的結果呈紅色，表示E.coli 可以將葡萄糖分解而產酸。
Voges-Proskauer test 的結果，E.coli，呈黃色。
Enterobacter aerogenes 產氣腸桿菌(p67 71)
Methyl red test 的結果，E.aerogenes，呈橘色
Voges-Proskauer test 的結果，E.aerogenes，呈紅色，表示E.aerogenes 可以將葡萄糖
分解而產酸，再繼續分解成非酸物質。
F.Simmons citrate agar slant(p69)
功能:鑑別各種腸內菌是否可利用citrate為唯一碳源
Bromthymol blue指示劑從綠色迳深藍色(陽性)
菌種們:
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61 71 68)
E.coli，呈綠色
Enterobacter aerogenes 產氣腸桿菌(p67 71 68)
E.aerogenes，呈藍色，表示E.aerogenes 可以利用citrate 作為碳源。
G.尿素酶試驗(p63)
功能:若微生物可分解尿素迳使酚紅變深紅色
細菌們:
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61 71 68 69)
E.coli 不會分解尿素
Proteus vulgaris 普通變型桿菌(p59 67 61)
P.vulgaris 會分解尿素所以成紅色
H.Trypticase soy agar slant(p31)
I. Tributyrin agar plate(p56)
功能:lipid hydrolysis
Triglyceride tributyrin在水溶液中呈現乳濁狀，若細菌分泌脂肪酶則可將之分解成水
溶性之酪脂酸及甘油迳在菌落周圍乳濁狀消失，產生清澈區域。
菌種們:
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61 71 68 69 63)
Bacillus cereus 仙人掌桿菌
呈現糊糊的樣子
Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌(P59 64 71)
有顏色變化
Staphylococcus aureus 金黃色葡萄球菌
J.Milk agar plate(p56)
功能:測試微生物可不可以分泌蛋白酶
菌種們:
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61 71 68 69 63 56)
Bacillus cereus 仙人掌桿菌(p56)
可以產生蛋白酶。
Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌(P59 64 71 56)
可以產生蛋白酶。
Staphylococcus aureus 金黃色葡萄球菌(p56)
K.MacConkey agar plate(p29)
功能:革蘭氏陽性菌會被抑制生長
細菌分解乳糖產生酸，使酸鹼指示劑呈紅色。
菌種們:
Escherichia coli大腸桿菌(P59 、64 67 61 71 68 69 63 56)
紅色一片迳革蘭氏陰性菌且能分解乳糖
Staphylococcus aureus 金黃色葡萄球菌(p56)
是革蘭氏陽性菌，被抑制生長。
Enterobacter aerogenes 產氣腸桿菌(p67 71 68 69)
紅色一片迳革蘭氏陰性菌且能分解乳糖
Salmonella Typhimurium 沙門氏鼠傷寒桿菌
白色一片迳革蘭氏陰性菌但不能分解乳糖
大家期末加油!! 二一的路上沒你沒我
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