→ DOMONIC:是我............. 11/05 20:24
A.植物色素的萃取：
1.取1g乾燥菠菜葉片至於研缽內，先行磨碎後，再加入10mL 80%丙酮研磨，以濾紙過濾並收集濾液，殘渣以5ml 80%丙酮再萃取一次，收集濾 液共15ml。
2.將濾液對著黑色背景處，可見到葉綠素吸光後放出的紅色螢光，若色素濃度太低，則觀察困難。
B.植物色素的分離：
1.取長條TLC薄片(20cmX2cm)，以毛細管吸取色素溶液，在分析薄片底端3cm處輕輕橫劃一條(小心，不要刮除薄片上的粉劑)，待色素乾後， 再重覆點劃，如此重複約10次即可。
2.取50ml或100ml玻璃量筒，內置展開液5ml，展開液之高度不碰到TLC薄片上之色素帶即可。
3.將劃有色素之TLC薄片置入量筒中，以保潔膜緊蓋量筒口，使成密閉系統。
4.展開液會因薄片之毛細現象而被吸附上升，帶動色素依其溶解度而分離之。
5.等色素分離後，取出TLC薄片，吹乾展開劑後，以色素原點為起點，測量各色素之RF值：
RF值=色素所行距離/展開液所行距離
6.以刀片或尺分別刮下薄片上所含色素點之粉劑，倒入微量離心管，加入80%丙酮溶出色素後，以離心法分離溶出知色素並去掉粉劑。
C.光何色素之吸收光譜：
1.開啟SP20電源暖機15分鐘後，調零點；將波長調至700nm處，以80%丙酮為空白 樣品(Blank)調至透光(T)滿點。吸取色素溶液放入測光管 (Cuvette)，插入儀器之樣品槽，測出特定波長知吸光度(Absorbance)。調新波長(原則上每次增加10nm)，重複空白校正及樣品測讀。測出色 素在400V至700V中，各單色光的吸光密度(Optical Density簡稱O.D.值)。以橫軸代表光波長，以縱軸代表O.D.值，將所得到的數據繪圖，可 得到光合色素的吸光光譜。
2.由實驗做出的吸光光譜，對照以知的各種光合色素吸光光譜，便可知道在TLC薄片上不同Rf值的色素帶是何種色素。
3.葉綠素的含量測定：經由分光光度計測定，可求得色素萃取液在波長645nm，663nm及652nm時的O.D.值，代入下列公式，計算每克植物葉片中 所含的葉綠素總量及葉綠素a和的b含量。
葉綠素a/植物葉片 (mg/g)=[12.7(O.D.663) - 2.69(O.D.645)] X [V/(1000 X W)]
葉綠素b/植物葉片 (mg/g)=[22.9(O.D.645) - 4.68(O.D.663)] X [V/(1000 X W)]
葉綠素總量植物葉片(mg/g)=[20.2(O.D.645) + 8.02(O.D.663)] X [V/(1000 X W)]
葉綠素總量植物葉片[(O.D.652 X 1000)/34.5] X [V/(1000 X W)]
O.D.：葉綠素萃取液的吸光密度
V：葉綠素萃取液(80%丙酮)總體積(ml)
W：葉片重量(克)
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※ 引述《oklahoma (cool bean)》之銘言：
楊熊我問你喔
實驗方法是誰負責的
我還沒收到你們的信捏!
快快
※ 引述《martinyang13 (楊熊)》之銘言：
: 二、實驗材料
: 1.高溫快速烘乾的菠菜葉，或新鮮植物葉片
: 2.80%丙酮
: 3.展開劑(丙酮：乙醚：正己烷=2：3：6)
: 4.TLC plate
: 5.分光光度計
: 6.毛細管
: 7.研缽、研杵、濾紙、漏斗、燒杯、量筒
: 8.微量離心管
: 以下略= =
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