Re: [問題] 生化的protein部分中

[BLACKOA (衝阿~~)]

※ 引述《anlest (我有問題)》之銘言：
: 請問一下
: 在protein purification - chromatighaphy - Affinity
: 什麼是金屬螯合層析法
: 可以解釋一下嗎

以Ni-NTG V.S His-tag做例子

NTG乃column中的固相材質 而Ni(鎳)也就是metal ligand
Ni會與NTG行成鍵結 而變成一個Ni-NTG complex<此為SOLID PHASE>
而我們所要purify的物質即是含有Histidine之protein
我們在做cloning的時候 常會在我們所要insert進去的plasmid之multiple colning site
的前端與後端 設計一組連續六個的His之sequence
而當我們expression protein之後 protein的前端或後端及含有
連續六個的His之amino acid sequence
此即稱為His-tag

而Histidine 之side chain 乃imidazole
此會與Ni形成affinity binding
所以我們才叫做金屬螯合層析法(Metal-Chelating Chromatography)





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◆ From: 140.112.213.49
※ 編輯: BLACKOA         來自: 140.112.213.49       (10/07 02:38)
推 oceanice:你是古人嗎.....
推 BLACKOA:WHAT??????????????
推 VioletSand:語法像古人
推 anlest:謝謝唷