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※ 引述《BLACKOA (衝阿~~)》之銘言: : ※ 引述《anlest (我有問題)》之銘言: : : 請問一下 : : 在protein purification - chromatighaphy - Affinity : : 什麼是金屬螯合層析法 : : 可以解釋一下嗎 : 以Ni-NTG V.S His-tag做例子 : NTG乃column中的固相材質 而Ni(鎳)也就是metal ligand : Ni會與NTG行成鍵結 而變成一個Ni-NTG complex<此為SOLID PHASE> : 而我們所要purify的物質即是含有Histidine之protein : 我們在做cloning的時候 常會在我們所要insert進去的plasmid之multiple colning site : 的前端與後端 設計一組連續六個的His之sequence : 而當我們expression protein之後 protein的前端或後端及含有 : 連續六個的His之amino acid sequence : 此即稱為His-tag : 而Histidine 之side chain 乃imidazole : 此會與Ni形成affinity binding : 所以我們才叫做金屬螯合層析法(Metal-Chelating Chromatography) http://www.webster-dictionary.org/definition/His-tag -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.166.86.101