※ 引述《BLACKOA (衝阿~~)》之銘言:
: ※ 引述《anlest (我有問題)》之銘言:
: : 請問一下
: : 在protein purification - chromatighaphy - Affinity
: : 什麼是金屬螯合層析法
: : 可以解釋一下嗎
: 以Ni-NTG V.S His-tag做例子
: NTG乃column中的固相材質 而Ni(鎳)也就是metal ligand
: Ni會與NTG行成鍵結 而變成一個Ni-NTG complex<此為SOLID PHASE>
: 而我們所要purify的物質即是含有Histidine之protein
: 我們在做cloning的時候 常會在我們所要insert進去的plasmid之multiple colning site
: 的前端與後端 設計一組連續六個的His之sequence
: 而當我們expression protein之後 protein的前端或後端及含有
: 連續六個的His之amino acid sequence
: 此即稱為His-tag
: 而Histidine 之side chain 乃imidazole
: 此會與Ni形成affinity binding
: 所以我們才叫做金屬螯合層析法(Metal-Chelating Chromatography)
http://www.webster-dictionary.org/definition/His-tag
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