※ 引述《BLACKOA (台大醫技三年級)》之銘言:
: 1.請問HRP(Horseradish peroxidase)與AP(Alkaline phosphatase)
: 這兩個在Western blot中所扮演的角色是什麼?
: 主要作用機制又是如何呢?
接在二抗上 跟substrate反應後放出光 用於觀察有沒有跟抗體結合的protein
HRP catalyzes the oxidation of luminol in the presence of H2O2
THe luminol which in excited state immediately decayed via light-emitting
AP 使substrate dephosphorylation 而放光 (老師給的那篇paper上寫的)
: 4.我們此次DNA電泳所用的Loding dye,往往會有三個明顯的色帶,
: 請說出此三個色帶各是什麼成分?其大小大約為多少呢?目的為何?
XC ~3000bp
BPB ~ 300bp
Orange G ~50bp
方便觀察電泳進行的程度
: 6.Transformation<轉殖作用>中有一步驟,(Heat shock-45秒鐘 at 42度C)
: 主要目的是什麼呢?
使細菌uptake plasmid DNA
:11.殖體DNA分離實驗中,Solution I II III都加入後,離心完後所得的分層溶液
:上下層各含有什麼呢?
上層主要有plasmid DNA RNA 鹽類
下層則是細菌的protein成分 chromosome DNA SDS
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