※ 引述《wenwentien (停下腳步活在當下)》之銘言：
: ※ 引述《barsar (Open your eyes)》之銘言：
: : 5.分離鑑定Prevotella 及 Fusobacterium
: : <Ans>
: : Prevotella Fusobacterium
: : kanamycin R S
: : 螢光 紅 綠
: : 染色型態 Fusiform，pleimorphism
: : 6.舉出三種在腹瀉時用來分離腸內菌的培養基，敘述其設計及欲分離之目標
: : <Ans> a.HE AGAR：分離Salmonella 及 Shigella
: : 發酵lactose使pH indicator(bromothymol blue) 呈黃色。含iron
: : salt 可測是否產H2S。Bile salt可抑制大部分的雜菌生長。
: : b.TCBS：分離Vibrio
: : thiosulfate 和 citrate使medium呈鹼性，bile and cholate抑制
: : 雜菌，vibrio會代謝產酸呈黃色colony
: : c.Campy-BAP：分離Campylobacter
: : 含sheep blood、vancomycin抑覺 Gram(+),trimethoprim(廣效性),
: : cephalothin (抑制 streptococci)
: : 7.試述分子檢驗方法及原理
: : <Ans>
: : PCR：Sepicific的primer夾出target
: : Nested PCR：兩對primer，第一次的product做為template再amplify，增加
: : 專一性。
: : Multiplex PCR：用兩對以上的primer，可同時放大多個基因片段
: : Real-time PCR：用螢光的probe 即時偵測PCR的產量
: : (今天珮珊seminar講的molecular beacon、Taqman )
: : RFLP：restriction fragment length polymorphism
: : SSCP：single strand conformation polymorphism
: : ssDNA folding的特殊結構只要有一個base的改變即會不同，利用
: : SDS-PAGE可敏銳的將conformation有差異的分子分離
: : PFGE：Pulsed Field Electrophoresis，通過電場的不斷改變，使DNA分子
: : 的泳動方向做相應改變，小的DNA分子比大的變形快，故小分子泳動
: : 得快，在gel上呈現出電泳帶型，可以用於大分子DNA的分離。
: : Probe hybridization 、 Microarray
: : DNA sequencing
: : 8.Campylobacter spp.在臨床上的重要性為何？如何鑑定？
: : <Ans> 常見的細菌性腸胃感染原。引起腹瀉、血便、腸胃炎、fever、
: : septicemia等症狀。因表面抗原跟神經細胞的Ag相似，可能併發GBS等自
: : 體免疫疾病。
: : Gram(-)bacilli,菌體彎曲。為microaerophilic 在5%O2 10% CO2 42度C
: : CAMPY BAP 培養兩天以上。Colony 為灰色黏狀，Oxidase(+)。
: : 細菌室做hipurate hydrolysis(+)發C.jejuni,(-)發C.coli
: 25機器血液培養的原理?
: Ans:
: 細菌:血瓶底部有特殊設計的滲透膜,當血液中有細菌時,會產生酸以及CO2等代謝物,
: 使得培養瓶內PH下降,改變膜的通透性,因此螢光被激發而釋出,故detector
: 可偵測到螢光
: 黴菌:同樣偵測螢光的產生,但其是利用黴菌生長需消耗O2,使得原本與O2結合的螢
: 光物質放出,故detector可偵測到
:
26敘述細菌室現在有做PCR的檢驗為何?
: Ans:分枝桿菌:COBAS AMPLICIOR MTB Test
原理: COBAS AMPLICOR MTB Test有四個主要步驟 檢體的製備,使用生物素
化之引子以PCR增幅目標DNA,專一性的核?酸探針雜交,以呈色偵測與
探針結合會增幅之產物
COBAS AMPLICOR MTB Test可同時進行MTB且DNA和分枝桿菌內部對照品
(Myco IC)DNA之增幅
Master Mix reagent含有具MTB及Myco IC專一性的生物素化引子對,
增幅的Myco IC DNA之偵測由使用者決定是否進行
: 27已知GPC,當catalase(-)的時候,進一步的鑑定流程?
: Ans:
先以溶血區分:
Beta-hemolysis:Streptococcus Group A:BA(S),PYR(+),SXT(R)
B:CAMP(+),SXT(R)
Alpha-hemolysis:Streptococcus pneumoniae:OP(S)
Viridans group:bile-esculin(-),6.5percent Nacl(-)
Alpha or Gama-hemolysis:Enterococcus spp.:PYR(+),bile-esculin(+),
6.5percent Nacl(+)
: 大家若有其他建議歡迎提出來....
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