新選組的組織與當時其他武力編制多有不同，例如導入小隊制度即是劃時期之舉。新
選組雖名為「組」，但最高的領導稱「局長」，初期有三位，即芹澤鴨、新見錦與近藤勇
。局長之下為輔佐的「副長」，幹部有「助勤」與「監察」。助勤在實際進行戰鬥時還擔
任小隊的「組長」，指揮其下隊士。
局長為新選組理所當然之代表，不插手日常隊務，因此輔佐局長的副長等於握有掌理
隊務的實權，可說是地下局長。監察的工作為內外的情報收集、間諜活動，監視內部成員
等等。此外，尚有「參謀」、「勘定役」（負責財務）與「師範」（分別指導擊劍、柔術
、砲術、槍術、馬術與文學），負責各事務分工。
而在戰鬥編制部份，五名隊士加上一位伍長成一「組」（共六人），而兩組共十二名
再由一位助勤（組長）領導，稱為「隊」。亦即一隊有十三名成員。戰鬥位置由前至後，
分別是「先鋒」、「次鋒」、「中鋒」、「殿軍」與負責輜重的「小荷馱雜具」。
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