※ [本文轉錄自 NTUACPP 看板]
作者: javaman (猜猜我是誰) 看板: NTUACPP
標題: 胺酸pI算法與分離
時間: Tue Nov 5 10:11:33 2002
要知道胺酸的pI 必先知道胺酸的 pka,各種胺酸的pka在生化課本上都有..
其pka衡定的有..amino group 為9.8 carboxyl group 為2.0 較不衡定的
為R-group....例如: aspartate 與 glutamate為 4.0
histidine的imidazolium為 6.0
Lysine為10.5
tyrosine為10.1
arginine的guanidium為12.5
cysteine為8.3
這些R-group的pka請背起來....
如何算pI呢: 先瞭解pI的定義吧! pI指AA電荷為0時的當時pH值稱為pI點,算pI的方法
為.AA電荷為0時左右的pka相加除上2.....
首先,先把所有的AA加上H+離子(因為是在酸性溶液內)再用鹼滴定慢慢脫氫..
例如: aspartate 的pI為 2+4/2=3 所以在buffer 7.0下為帶-1電荷
glysine 的 pI為2+9.8/2=5.8所以在buffer 7.0下為-1/3電荷
glucose 的 pI為10所以..buffer 7.0下為帶正電荷...
所以用陰離子交換樹脂分離流出先後為...glucose先出來,其次 glysine最後aspartate
因aspartate帶的負電最多.吸的最緊..
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