正式的 開始了我的實驗
(以前那些當小工及打發時間的小實驗不算)
也終於開始體會研究生的苦悶
為了要早點有個結果
才能知道後續方向
所以硬把實驗排在一個星期內做完
所以要做到晚上六七點
還犧牲了一堆想去做的事
結果卻是沒有結果的結果
連 negative control 都有不弱的signal
這是怎麼回事啊
(我是做 IP-Weatern
negative control表現的蛋白沒有tag
應該不會被 IP 下來 )
下星期 又是另一個艱苦的開始了
累就算了....
至少給個有可性度及代表意義的結果嘛
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學姊要壓片2分鐘才可以看到的 band
我壓10秒就可以看到了ㄟ
這絕對有問題..................................
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◆ From: 61.218.3.51
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作者: laigo (還在想) 看板: BOTANY_90
標題: Re: 做白工....
時間: Sat Feb 2 18:16:21 2002
※ 引述《KKKids ( 等待奇蹟)》之銘言：
: 正式的 開始了我的實驗
: (以前那些當小工及打發時間的小實驗不算)
: 也終於開始體會研究生的苦悶
: 為了要早點有個結果
: 才能知道後續方向
: 所以硬把實驗排在一個星期內做完
: 所以要做到晚上六七點
: 還犧牲了一堆想去做的事
: 結果卻是沒有結果的結果
: 連 negative control 都有不弱的signal
: 這是怎麼回事啊
: (我是做 IP-Weatern
: negative control表現的蛋白沒有tag
: 應該不會被 IP 下來 )
: 下星期 又是另一個艱苦的開始了
: 累就算了....
: 至少給個有可性度及代表意義的結果嘛
嗯....很想提供意見.......
可是看了看.......我也不知道為什麼....
是不是sample污染了?
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朋友是一種矛盾的存在,我是獨特的個體,
理應沒有另一個人與我相同,但是看看我的朋友,
雖然外觀迥異,卻在生命本質上十分雷同,
友誼實不愧為造物者的傑作.
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◆ From: 140.112.197.80
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: Karyon (超無力卡不勇) 看板: BOTANY_90
標題: Re: 做白工....
時間: Sun Feb 3 02:24:16 2002
※ 引述《KKKids ( 等待奇蹟)》之銘言：
: 正式的 開始了我的實驗
: (以前那些當小工及打發時間的小實驗不算)
: 也終於開始體會研究生的苦悶
: 為了要早點有個結果
: 才能知道後續方向
: 所以硬把實驗排在一個星期內做完
: 所以要做到晚上六七點
: 還犧牲了一堆想去做的事
: 結果卻是沒有結果的結果
: 連 negative control 都有不弱的signal
: 這是怎麼回事啊
: (我是做 IP-Weatern
: negative control表現的蛋白沒有tag
: 應該不會被 IP 下來 )
只講這樣實在不知道你的實驗在作什麼
不知道你是怎麼做negative control?
想要證明什麼事？
看你的講法好像是你的negative control有表現蛋白
但是沒有tag sequence
會不會是antibody specificity的問題阿？
或許可以查查看你的protein有沒有和tag相似的序列
說不定有相似的序列
: 下星期 又是另一個艱苦的開始了
: 累就算了....
: 至少給個有可性度及代表意義的結果嘛
我想問的是
你有沒有抓到你期待的那個bend?
--
猜猜我有多愛妳....
我愛妳... 從這裡到一直到月亮...
再---繞回來
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◆ From: 140.112.253.203
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: KKKids ( 等待奇蹟) 看板: BOTANY_90
標題: Re: 做白工....
時間: Mon Feb 4 12:53:00 2002
※ 引述《Karyon (超無力卡不勇)》之銘言：
: ※ 引述《KKKids ( 等待奇蹟)》之銘言：
: : 正式的 開始了我的實驗
: : (以前那些當小工及打發時間的小實驗不算)
: : 也終於開始體會研究生的苦悶
: : 為了要早點有個結果
: : 才能知道後續方向
: : 所以硬把實驗排在一個星期內做完
: : 所以要做到晚上六七點
: : 還犧牲了一堆想去做的事
: : 結果卻是沒有結果的結果
: : 連 negative control 都有不弱的signal
: : 這是怎麼回事啊
: : (我是做 IP-Weatern
: : negative control表現的蛋白沒有tag
: : 應該不會被 IP 下來 )
: 只講這樣實在不知道你的實驗在作什麼
: 不知道你是怎麼做negative control?
: 想要證明什麼事？
: 看你的講法好像是你的negative control有表現蛋白
: 但是沒有tag sequence
: 會不會是antibody specificity的問題阿？
: 或許可以查查看你的protein有沒有和tag相似的序列
: 說不定有相似的序列
: : 下星期 又是另一個艱苦的開始了
: : 累就算了....
: : 至少給個有可性度及代表意義的結果嘛
: 我想問的是
: 你有沒有抓到你期待的那個bend?
大概解釋一下
我想要看看EBNA2是否對chk1 Chk2的phosphorylation有沒有影響
所以利用cotransfect外送EBNA2及 Chk1 Chk2(上面有不同的tag)
然後利用IP將Chk1 Chk2抓下來
再利用anti-phosphorylation Chk1 or Chk2的antibody作western assay
去認有phosphorylation的Chk1及Chk2
然後 今天知道我哪裡出槌了
應該是antibody加錯了
所以western的二抗都認到IP時加入的抗體
而不是一抗.........
結論是...........再重做一次
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下次絕對不一次卡兩個實驗
絕對要很休閒的作實驗..............
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我看見一隻魚 一隻對我微笑的魚....
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◆ From: 210.62.76.37