小弟最近做 subclone 用到 DraIII(BioLab) 這隻酵素
不過截切了數次都切不動
包括我自己的subclone plasmid or vector (pBK-CMV)
另外據我學姊說她以前用 DraIII 切 PCR product也切不動
所以該不是 methylation 等的影響
在此想請問一下有沒有人用過 BioLab 的 DraIII
其截切效率是否真的這麼差.....:(
還是我自己的 DNA 純度不足？？
不過我用 EcoRI or ApaI (both BRL)都切得動ㄋㄟ？？
麻煩大家幫幫忙囉！
多謝大家
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標 題: Re: DraIII截切效率好嗎？
發信站: 中山計中美麗之島 (Tue Oct 27 14:48:14 1998)
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可能受 methylation 的影響,你將DNATRANSFOR 到 DAM~的
competent cell之後再抽 plasmid DNA 再用DraIII切切看
若在不行,請你查查你 gene MAP 到底有沒有DraIII engyme
的位點,若沒有當然切不動啦!
DNA純度不足頂多會使sample看起來量較少或有其他的雜BAN
不會切不動.
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