請問被酵素切一刀的plasmid~上面的基因會表現嗎~~~

[CEFCA (啦啦啦)]

會表現嗎~~
聽說是不會~~
可是感覺和環狀時沒啥不同呀~
為什麼不會呢~
可以告訴我嗎~

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.twbbs.org) 
◆ From: ym80146.ym.edu.tw

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發信人: [e-mail], 看板: Biology
標  題: Re: 請問被酵素切一刀的plasmid~上面的基因會表現嗎~~~
發信站: 交大生科生命之光 (Thu Aug 10 19:49:22 2000)
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※ 引述 [e-mail] (啦啦啦) 的銘言:
: 會表現嗎~~
: 聽說是不會~~
: 可是感覺和環狀時沒啥不同呀~
: 為什麼不會呢~
: 可以告訴我嗎~

在哪裡表現？胞內或胞外(cell-free)？
如果是胞內，是送進去在切還是切了再送？
怎麼送？
怎麼切？
還有您的感覺是從何而來？(感覺沒什麼不同)
是說DNA solution 都是透明水水的嗎？ :)

是否請您講清楚一點呢？


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作者: CEFCA (啦啦啦) 看板: Biology
標題: Re: 請問被酵素切一刀的plasmid~上面的基因會表現嗎~~~
時間: Thu Aug 10 16:30:03 2000

: 在哪裡表現？胞內或胞外(cell-free)？
: 如果是胞內，是送進去在切還是切了再送？
: 怎麼送？
: 怎麼切？
: 還有您的感覺是從何而來？(感覺沒什麼不同)
: 是說DNA solution 都是透明水水的嗎？ :)
: 是否請您講清楚一點呢？
嗯嗯~~原來那麼複雜呀~~
我本來是想問說~~
ligation沒有成功的線狀plasmid在細菌裡會表現嗎

順便問一下唷~~
在送進細胞裡再切要怎樣切呀~~
好像蠻好玩的~呵~


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發信人: [e-mail] (珍貴的大憨蓮...), 看板: Biology
標  題: Re: 請問被酵素切一刀的plasmid~上面的基因會表現嗎~~~
發信站: 元智大學風之塔 (Thu Aug 10 19:44:03 2000)
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※ 引述《benbell (珍貴的大憨蓮...)》之銘言：
> ※ 引述《[e-mail] (啦啦啦)》之銘言：
> > 嗯嗯~~原來那麼複雜呀~~
> > 我本來是想問說~~
> > ligation沒有成功的線狀plasmid在細菌裡會表現嗎
> > 順便問一下唷~~
> > 在送進細胞裡再切要怎樣切呀~~
> > 好像蠻好玩的~呵~
> linear的plasmid沒有辦法正常的replicate
> 所以沒有辦法在進行transformation後看到transforment
補充一下...
linear的plasmid可能(我猜測的)可以在細胞裡頭表現
但由於沒有辦法複製..所以此後的子代都沒有這個plasmid
因此在recombinant DNA的過程中一定要將線性的plasmid接成circular
才有transformation的意義...

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發信人: [e-mail] ( 愛情加護病房 ), 看板: Biology
標  題: Re: 請問被酵素切一刀的plasmid~上面的基因會表現嗎~~~
發信站: 台大醫學院◎楓城杏話◎ (Sat Aug 12 00:37:35 2000)
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※ 引述《[e-mail]》之銘言：
: ※ 引述 [e-mail] (啦啦啦) 的銘言:
: : 會表現嗎~~
: : 聽說是不會~~
: : 可是感覺和環狀時沒啥不同呀~
: : 為什麼不會呢~
: : 可以告訴我嗎~


    如果這一刀不是切在很重要的地方
    如破壞了promoter或是讓target gene破壞了就無法表現
    不然應該都會表現  只是表現的efficiecy不如circular form
    來的好

    不過如果這段linear form的DNA有幸integrate到genome中的話
    那麼必定會表現  且表現得不錯

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發信人: [e-mail] (休息是待會的事), 看板: Biology
標  題: Re: 請問被酵素切一刀的plasmid~上面的基因會表現嗎~~~
發信站: 台大計中椰林風情站 (Sun Aug 13 07:14:29 2000)
轉信站: Ptt!bbs.ee.ntu!Palmarama

==> [e-mail] ( 愛情加護病房 ) 提到:
> ※ 引述《[e-mail]》之銘言：
>     如果這一刀不是切在很重要的地方
>     如破壞了promoter或是讓target gene破壞了就無法表現
>     不然應該都會表現  只是表現的efficiecy不如circular form
>     來的好
>     不過如果這段linear form的DNA有幸integrate到genome中的話
>     那麼必定會表現  且表現得不錯
             還是要看integrate到genome的位置吧
             不然做transgene的人就皆大歡喜了