請問利用His tag純化後
想把它切掉
有哪些方法呢???
有無references?
是否有特定的vector設計方法????
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發信人: Maveric.bbs@bbs.csmc.edu.tw (AlfaFan), 看板: Biology
標 題: Re: 關於His tag~~~~~
發信站: 中山醫學院BBS站 (Tue Sep 5 13:06:12 2000)
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【 在 minibee.bbs@cis.nctu.edu.tw (迷你蜜蜂) 的大作中提到: 】
: 請問利用His tag純化後
: 想把它切掉
: 有哪些方法呢???
: 有無references?
: 是否有特定的vector設計方法????
基本上His tag無法切除. 還好一般都用6X His tag, 所以tag不是很長, 不易影響
protein的conformation. 有人用5X His tag, 效果也很好.
此類vector大多為commercial product, 如Qiagen的pQE系列. 也有人自己modify
vector. 至於tag要在N-terminus或C-terminus則看個人所需.
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發信人: tttest.bbs@bbs.kimo.com.tw (變色龍), 看板: Biology
標 題: Re: 關於His tag~~~~~
發信站: 奇摩大摩域 (Tue Sep 5 16:14:03 2000)
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※ 引述《Maveric.bbs@bbs.csmc.edu.tw (AlfaFan)》之銘言：
> 【 在 minibee.bbs@cis.nctu.edu.tw (迷你蜜蜂) 的大作中提到: 】
> : 請問利用His tag純化後
> : 想把它切掉
> : 有哪些方法呢???
> : 有無references?
> : 是否有特定的vector設計方法????
> 基本上His tag無法切除. 還好一般都用6X His tag, 所以tag不是很長, 不易影響
> protein的conformation. 有人用5X His tag, 效果也很好.
> 此類vector大多為commercial product, 如Qiagen的pQE系列. 也有人自己modify
> vector. 至於tag要在N-terminus或C-terminus則看個人所需.
tag通常都會有所謂的linker接到目標蛋白上
而linker通常是一小段多 月太 序列
且具有特定protease的切點
所以若要切掉His-tag,應先檢查linker序列,再選用適當的protease切即可