SINICA 撰寫於文章 <8rh1rl$qgf$1@news1.sinica.edu.tw>...
>因為有些target gene的表現對E.coli而言有害,而事實上在induction前這些target
>gene有時候會很少量的表現,如此一來你的E.coli就會長的很不爽.而pLys 的目的就是
>為了"抑制"在induction前target gene的少量表現.當然也會在induction的過程中稍
微去抑制
>一下target gene的表現,不過事實上似乎沒那麼嚴重.不過如果你的target gene在其
他
>不含pLys vector的E.coli strain ( Ex: JM109 DE3.....)的表現正常的話,是不需要
>用pLysS or E.反之,如果target gene的表現對E.coli有害,讓你的E.coli長的很差或
是
>表現不出來.那你就非用不可了.
>ps.不過表現不出來的原因太多了...............
>乖乖 撰寫於文章 <3ceEiU$JLd@bbs.ntu.edu.tw>...
>>最近要用pET system表現蛋白，對於整個系統表現有一個問題，
>>
>>就是在host cell是藉由IPTG調控E coli genome 中 T7 RNA polymerase的表現，同
時
>>
>>也藉由IPTG調控pET plasmid 上target gene的表現，此時若沒有加IPTG，pLysS or
E
>>
>>plasmid 上會有T7 lysozyme gene表現T7 lysosyme使T7 RNA polymerase 不活化，
藉
>此
>>
>>來調控target gene表現，若此時加入IPTG，lysozyme gene依然繼續表現，T7 RNA
>>
>>polymerase仍然不活化，如此會大大影響target gene的表現，因此想請教專家，整
個
>pET
>>
>>system這樣解釋合理嗎？煩請各位解答我的問題，謝謝！！
>>
>>整個系統的瞭解是依據Novagen目錄。
>>--
>>☆ [Origin:椰林風情] [From: 140.112.99.5] [Login: **] [Post: 50]
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