用一個primer 所做的PCR產物只有110bp左右
如何再跑電泳時 與其他band分離開來
用的電壓100V or 50 V哪一個較好
膠體用agarose or PAGE選哪一個
除了PCR 的產物110bpb band 以外還有比110bp還低的雜band如何處理(以排除DNA
contamination)
如果知道的話請回信 感激不盡
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Ξ Origin: 中興大學天樞資訊網 <bbs@bbs.nchu.edu.tw> [FROM: 140.120.130.37]
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發信人: tip.bbs@bbs.svdcc.fju.edu.tw (維生方糖), 看板: Biology
標 題: Re: PCR product 一問
發信站: 輔仁大學美少女夢工場 BBS 站 (Thu Aug 17 10:47:51 2000)
轉信站: Ptt!bbs.ee.ntu!news.ntu!spring!news.svdcc.fju!Princess
【 在 b4tt.bbs@bbs.ntu.edu.tw (水編織) 的大作中提到: 】
: ==> finch.bbs@bbs.nchu.edu.tw (boyboyboy) 提到:
: > 用一個primer 所做的PCR產物只有110bp左右
: > 如何再跑電泳時 與其他band分離開來
: > 用的電壓100V or 50 V哪一個較好
: ^^^快！ ^^^跑得較平穩、漂亮
: 跑agarose沒多大差別，所以我們都用100V
可用濃度高些的gel....
或是用sequence gel來跑也可以.....
: > 膠體用agarose or PAGE選哪一個
: agarose跑110是還跑得開啦！用大片的，較長的即可，慢慢跑
: 不過最好用100bp的marker
: > 除了PCR 的產物110bpb band 以外還有比110bp還低的雜band如何處理(以排除DNA
: > contamination)
: 如果真的需要很pure，那跑PAGE來分是無話可說的！
: 如果要用agarose賭賭看的話，就像我上面說的一樣，用大片的跑開
: 做gel elute
: > 如果知道的話請回信 感激不盡
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發信人: starlet.bbs@bbs.kimo.com.tw (老猩猩), 看板: Biology
標 題: Re: PCR product 一問
發信站: 奇摩大摩域 (Thu Aug 17 22:47:32 2000)
轉信站: Ptt!bbs.ee.ntu!freebsd.ntu!news.cs.nthu!bbsnews.kimo.com.tw!KimoBBS
※ 引述《b4tt.bbs@bbs.ntu.edu.tw (水編織)》之銘言：
> ==> finch.bbs@bbs.nchu.edu.tw (boyboyboy) 提到:
> > 用一個primer 所做的PCR產物只有110bp左右
> > 如何再跑電泳時 與其他band分離開來
> > 用的電壓100V or 50 V哪一個較好
> ^^^快！ ^^^跑得較平穩、漂亮
100mV雖然較快，但是buffer會比較快發熱，
容易產生氣泡，所以我比較喜歡用50mV。
> 跑agarose沒多大差別，所以我們都用100V
> > 膠體用agarose or PAGE選哪一個
> agarose跑110是還跑得開啦！用大片的，較長的即可，慢慢跑
> 不過最好用100bp的marker
要跑比較短的DNA sequence，
agarose gel濃度可以高一些，至少2%以上，
至於原因，可參考「molecular cloning」。
> > 除了PCR 的產物110bpb band 以外還有比110bp還低的雜band如何處理(以排除DNA
> > contamination)
> 如果真的需要很pure，那跑PAGE來分是無話可說的！
> 如果要用agarose賭賭看的話，就像我上面說的一樣，用大片的跑開
> 做gel elute
> > 如果知道的話請回信 感激不盡