※ 引述《Quixote.bbs@cis.nctu.edu.tw (don)》之銘言：
> as title
> 我用的RNA extraction kit中有提到說如果要長期保存（long-term storage），可
> 將RNA suspend在DEPC處理過的水，加入sodium acetate至濃度0.25M，再加入
> 2.5倍體積的酒精後於-80度保存。
> 只是這樣保存的RNA要如何再使用呢（例如以後要做RT-PCR）？要怎麼把sodium
自-80取出後離心將RNA沉澱下來
再用70%酒精wash一次去掉sodium acetate
然後再離心一次
吸掉上清液後風乾(或進speedvacuum)
再用MQ溶, then 定量....
> acetate等除去？如果用上述的方法可以保存多久？
理論上是可以保存很多年
我的sample在兩年後拿出來再做還是沒啥問題
> 又如果萃取出來的RNA直接於-80度下保存又可以保存多久呢？
沒記錯的話應該在一年以內
> 如果日後要做的步驟是要把部分sequence用PCR放大的話，是不是就不大需要考慮
> RNA degration的問題，因為PCR可以放大的倍數很大？
不! 萬一您要看的mRNA已經被RNase剁得碎碎的
您用PCR再怎樣還是沒法放大
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※ Origin: 鴨子寮 <duckhouse.twbbs.org>
◆ From: pc-61-017.hosp.ncku.edu.tw
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發信人: Quixote.bbs@cis.nctu.edu.tw (don), 看板: Biology
標 題: Re: RNA保存的問題？
發信站: 交大資科_BBS (Thu May 25 22:16:26 2000)
轉信站: Ptt!news.ntu!freebsd.ntu!ctu-peer!news.nctu!news.iim.nctu!news.cis.nct
==> 在 gogo.bbs@duckhouse.twbbs.org (開始游泳了) 的文章中提到:
> 理論上是可以保存很多年
> 我的sample在兩年後拿出來再做還是沒啥問題
> > 又如果萃取出來的RNA直接於-80度下保存又可以保存多久呢？
> 沒記錯的話應該在一年以內
不好意思，再問一下：直接保存的話RNA比較不能保存那麼久，是RNase在-80度時
還有些微的活性可以破壞RNA，還是冰凍的過程對RNA本身也是個傷害呢？
> > 如果日後要做的步驟是要把部分sequence用PCR放大的話，是不是就不大需要考慮
> > RNA degration的問題，因為PCR可以放大的倍數很大？
> 不! 萬一您要看的mRNA已經被RNase剁得碎碎的
> 您用PCR再怎樣還是沒法放大