在做轉型實驗前要先制備勝任細胞
為什麼呢?
所謂的勝任細胞是用什麼方法做的呢?
這個步驟跟轉型實驗有什麼關係呀?
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標 題: Re: 制備competent cell的問題
發信站: 奇摩大摩域 (Fri Jun 16 10:17:43 2000)
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※ 引述《wumei.bbs@bbs.ntu.edu.tw (嗚咪)》之銘言：
> 在做轉型實驗前要先制備勝任細胞
> 為什麼呢?
> 所謂的勝任細胞是用什麼方法做的呢?
> 這個步驟跟轉型實驗有什麼關係呀?
在自然界中有幾種細菌可以作轉型作用
但是大腸桿菌不是其中的一種
所以若是要拿大腸桿菌作轉型作用
則必先將之製備成轉型勝任細胞
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標 題: Re: 制備competent cell的問題
發信站: 奇摩大摩域 (Fri Jun 16 16:37:42 2000)
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※ 引述《wumei.bbs@bbs.ntu.edu.tw (嗚咪)》之銘言：
> 在做轉型實驗前要先制備勝任細胞
> 為什麼呢?
> 所謂的勝任細胞是用什麼方法做的呢?
> 這個步驟跟轉型實驗有什麼關係呀?
因為普通的細胞很難把你要的東西塞進去
勝任細胞(competent cell)是經過處理的,有這種"體質"
製作competent cell的方法我已經忘了...
只記得要保存在calcium chloride中
以保持他的通道打開在不穩定狀態,
在transformation前用42度加溫,就可以把細胞的洞打開大大的
讓要送進去的核酸有機可乘
不過現在好像有commercial的competent cell在賣