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前天剛講完的seminar 作了一點小整理 跟大家分享 Therapeutic silencing of an endogenous gene by systemic administration of modified siRNAsNature. 2004 Nov 11;432(7014):173-8. 1)本篇是第一篇利用修飾的siRNA來默化內生性基因(apoB使其不能合成LDL Cholestrol) 以達到治療功效 2)作者本先利用在antisense strand siRNA 接上cholestrol 來增加此siRNA的藥理特性 包括1.增加其半衰期2.較不易被血漿清走 3.使比較易與人類血清蛋白作結合4.並可以在 人類的肝臟及空腸能偵測到有接上cholestrol的iRNA(因為apoB mRNA與protein 存在此處]5.接上chol的siRNA在人類血清內其存在完整性比沒有接上的還有多50%以上 表示其穩定性比較佳 3)作者利用生物資訊選了84組siRNA並在nucleotide上面作甲基化及兩股間作 Phosphorothioate修飾來防止被體內或細胞的exo與endonclease切掉並在3端 加上cholestrol增加藥理特性並使其到達apoB之處而可以在此處降解apoB最後 在in vitro中選出兩組chol-apoB1-siRNA及chol-apoB2-siRNA 4)作者有用螢光試驗測試接了chol的siRNA其默化的能力是否會消失 因為依舊會使螢光 表現降低所以結論是不會 5)進入老鼠實驗驗證chol-apoB1-siRNA會存在肝臟及空腸並會有抑制老鼠的 apoB mRNA protein的功效進而利用NMR作lipoprotein profile可以看到LDL 與chylmicron會有降低40%以上的功效因為它們兩個的內生性基因是apoB100與apo48 6)最後作者擔心大家懷疑chol-apoB1-siRNA會如同一般的藥是亂攻擊所以利用5-RACE 來證明此siRNA切割的位置正如同他所設計的 7)最後結論部分作者提到可以利用siRNA用在臨床上來默化內生性基因而在siRNA 上作其他修飾可以增加其特性 **本篇可貴地方在於第一篇成功用siRNA默化在哺乳類體內的內生性基因 -- 變變變 時代正在改變 扁扁扁 選叫愛要選阿扁 夢想就要實現 陽光已經看見 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.213.145
oplz:這一篇很棒, 影響也會很大.. 134.174.178.197 12/02
> -------------------------------------------------------------------------- < 作者: boyo (29大頭) 看板: Biotech 標題: Re: [撲滿]RNAi在apoB臨床的應用 時間: Wed Dec 1 21:51:22 2004 ※ 引述《coconutt (人活的快樂就好)》之銘言: : 6)最後作者擔心大家懷疑chol-apoB1-siRNA會如同一般的藥是亂攻擊所以利用5-RACE : 來證明此siRNA切割的位置正如同他所設計的 : 7)最後結論部分作者提到可以利用siRNA用在臨床上來默化內生性基因而在siRNA : 上作其他修飾可以增加其特性 : **本篇可貴地方在於第一篇成功用siRNA默化在哺乳類體內的內生性基因 恕刪 請教一下siRNA 跟 RNAi 是相同的東西嗎 因為我同學作好siRNA注射到大白鼠體內 degrate速度好像很快 -- 如果孔子是那待沽的玉 我便是待斟的酒 用一生的時間 蘊釀自己的濃度 只為等待剎那的傾注 張曉風 釀酒的理由 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.220.202.88 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: aggaci (五子棋啦) 看板: Biotech 標題: Re: [撲滿]RNAi在apoB臨床的應用 時間: Thu Dec 2 00:24:35 2004 ※ 引述《boyo (29大頭)》之銘言: : ※ 引述《coconutt (人活的快樂就好)》之銘言: : : 6)最後作者擔心大家懷疑chol-apoB1-siRNA會如同一般的藥是亂攻擊所以利用5-RACE : : 來證明此siRNA切割的位置正如同他所設計的 : : 7)最後結論部分作者提到可以利用siRNA用在臨床上來默化內生性基因而在siRNA : : 上作其他修飾可以增加其特性 : : **本篇可貴地方在於第一篇成功用siRNA默化在哺乳類體內的內生性基因 : 恕刪 : 請教一下siRNA 跟 RNAi 是相同的東西嗎 : 因為我同學作好siRNA注射到大白鼠體內 degrate速度好像很快 siRNA算是cell內某些特定長度(22~27 bp)的RNA RNAi算是種技術吧 當然這是我的說法 不知有沒有更熟的人來解釋? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: blence ( ) 看板: Biotech 標題: Re: [撲滿]RNAi在apoB臨床的應用 時間: Thu Dec 2 00:43:09 2004 ※ 引述《boyo (29大頭)》之銘言: : ※ 引述《coconutt (人活的快樂就好)》之銘言: : : 6)最後作者擔心大家懷疑chol-apoB1-siRNA會如同一般的藥是亂攻擊所以利用5-RACE : : 來證明此siRNA切割的位置正如同他所設計的 : : 7)最後結論部分作者提到可以利用siRNA用在臨床上來默化內生性基因而在siRNA : : 上作其他修飾可以增加其特性 : : **本篇可貴地方在於第一篇成功用siRNA默化在哺乳類體內的內生性基因 : 恕刪 : 請教一下siRNA 跟 RNAi 是相同的東西嗎 : 因為我同學作好siRNA注射到大白鼠體內 degrate速度好像很快 請看一下這篇 What's new about RNAi? Meeting on siRNA and miRNAs EMBO Reports 5, 762-765 (2004) 這是一篇Meeting report,所以應該不會寫得很艱深 而且裡面那張圖把siRNA,miRNA....等作用的機制 交代得很清楚 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.31.141.3 ※ 編輯: blence 來自: 61.31.141.3 (12/02 13:39) > -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: midi.bbs@bbs.Life.NCTU.edu.tw (~真夏冰釀的美酒~o), 看板: Biotech 標 題: Re: [撲滿]RNAi在apoB臨床的應用 發信站: 交大生科勁公園 (Thu Dec 2 05:41:32 2004) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost ※ 引述《blence.bbs@ptt.cc ( )》之銘言: : ※ 引述《boyo (29大頭)》之銘言: : : 恕刪 : : 請教一下siRNA 跟 RNAi 是相同的東西嗎 : : 因為我同學作好siRNA注射到大白鼠體內 degrate速度好像很快 : 請看一下這篇 : What's news about RNAi? Meeting on siRNA and miRNAs : EMBO Reports 5, 762-765 (2004) : 這是一篇Meeting report,所以應該不會寫得很艱深 : 而且裡面那張圖把siRNA,miRNA....等作用的機制 : 交代得很清楚 我想說 你的標題打錯了..@@" 不是What's news..google找不到^^| 不過最後我還是去EMBO Reports找:p 所以標題應該是" What's new about RNAi? Meeting on siRNA and miRNAs EMBO Reports 5, 762-765 (2004)" 順便附上這篇的link http://emboreports.npgjournals.com/cgi/reprint/5/8/762 -- ※Post by midi from E182.Life.nctu.edu.tw