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現在想要看兩個protein 的位置是否有relocalization 目前手上有pEGFP-N1 簡單的想法用一個紅色螢光的蛋白 就可以觀察到 不知道有什麼常用或好用的紅色蛋白可以使用? 另外就是使用confocal時 有什麼要注意的地方? 一個正要開始作的人^^" -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.210.11 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: HAYATO (BookHunter) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 時間: 01/26/2005 12:10:52 Wed ※ 引述《verybighead (whc)》之銘言: : 現在想要看兩個protein 的位置是否有relocalization : 目前手上有pEGFP-N1 : 簡單的想法用一個紅色螢光的蛋白 就可以觀察到 : 不知道有什麼常用或好用的紅色蛋白可以使用? : 另外就是使用confocal時 有什麼要注意的地方? : 一個正要開始作的人^^" http://host.cc.ntu.edu.tw/biotech/Confocal%20Homepage/index.html 可參考一下 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.130.222 > -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: [email protected] (& Paul Van Dyk &), 看板: Biotech 標 題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 發信站: 不良牛牧場 (Wed Jan 26 12:10:51 2005) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost 看你的laser是哪種燈源@_@ 一般會用TRITC或是Texas Red ※ 引述《[email protected] (whc)》之銘言: : 現在想要看兩個protein 的位置是否有relocalization : 目前手上有pEGFP-N1 : 簡單的想法用一個紅色螢光的蛋白 就可以觀察到 : 不知道有什麼常用或好用的紅色蛋白可以使用? : 另外就是使用confocal時 有什麼要注意的地方? : 一個正要開始作的人^^" 我也才剛開始作 xD -- / ☆ / / / ☆ / 你是巨大的海洋 我是雨下在妳身上 我失去自己的形狀 我看到遠方 愛情的模樣 曾經孤單的徬徨 曾經相信曾經失望 妳穿過重重的迷惘 那愛的慌張 終於要解放 你是誰 教我狂戀 教我勇敢地挑戰全世界 在一樣的身體裡面 一樣有愛與被愛的感覺 我愛誰 已無所謂 沒有誰能將愛情劃界限 在一樣地身體裡面 迷樣的魔力卻是更強烈 星星在夜空中閃亮 星空下我不停流浪 此生我無知的奔忙 因為你眼光 都化成了光亮 這世界全部的漂亮 不過妳可愛的模樣 妳讓我舉雙手投降 跨出了城牆 長出了翅膀 -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ Welcome to SimFarm BBS -- From : [140.112.121.97] ◣◣◢ ◢◢不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo ◣◣─╯ > -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: [email protected] (寂寞海灣), 看板: Biotech 標 題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 發信站: 不良牛牧場 (Wed Jan 26 14:22:58 2005) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost ※ 引述《[email protected] (BookHunter)》之銘言: : ※ 引述《verybighead (whc)》之銘言: : : 現在想要看兩個protein 的位置是否有relocalization : : 目前手上有pEGFP-N1 : : 簡單的想法用一個紅色螢光的蛋白 就可以觀察到 : : 不知道有什麼常用或好用的紅色蛋白可以使用? : : 另外就是使用confocal時 有什麼要注意的地方? : : 一個正要開始作的人^^" : http://host.cc.ntu.edu.tw/biotech/Confocal%20Homepage/index.html : 可參考一下 問一下喔 confocal是可以直接看到細胞內的分子嗎 例如蛋白等...... 好心的大爺回我一下吧*^__^* -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ Welcome to SimFarm BBS -- From : [218.170.156.41] ◣◣◢ ◢◢不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo ◣◣─╯
aggaci:要染才行 或接螢光蛋白 140.114.100.165 01/26
> -------------------------------------------------------------------------- < 作者: lpw4660 (lpw4660) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 時間: 01/26/2005 18:36:39 Wed ※ 引述《[email protected] (寂寞海灣)》之銘言: : ※ 引述《[email protected] (BookHunter)》之銘言: : : http://host.cc.ntu.edu.tw/biotech/Confocal%20Homepage/index.html : : 可參考一下 : 問一下喔 : confocal是可以直接看到細胞內的分子嗎 : 例如蛋白等...... : 好心的大爺回我一下吧*^__^* 只是用切成一片片的角度去照 這般的話如果是 不在同一平面的話 2蛋白就不會在一起 避免勿以為colocalization Ds-red的vector有許多適合紅色的 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.65.166 > -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: [email protected] (寂寞海灣), 看板: Biotech 標 題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 發信站: 不良牛牧場 (Wed Jan 26 20:34:12 2005) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost ※ 引述《[email protected] (lpw4660)》之銘言: : ※ 引述《[email protected] (寂寞海灣)》之銘言: : : 問一下喔 : : confocal是可以直接看到細胞內的分子嗎 : : 例如蛋白等...... : : 好心的大爺回我一下吧*^__^* : 只是用切成一片片的角度去照 這般的話如果是 : 不在同一平面的話 2蛋白就不會在一起 : 避免勿以為colocalization : Ds-red的vector有許多適合紅色的 ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ 不好意思ㄟ!! 有點看不懂??^^" 我想問的是confocal顯微鏡的極限 可以見到細胞中分子那麼小嗎? 還是只限制在cell大小的3D結構而已?? -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ Welcome to SimFarm BBS -- From : [218.162.115.244] ◣◣◢ ◢◢不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo ◣◣─╯ > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: vmp (維基百科見習編輯) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 時間: 01/26/2005 23:34:40 Wed ※ 引述《[email protected] (& Paul Van Dyk &)》之銘言: : 看你的laser是哪種燈源@_@ : 一般會用TRITC或是Texas Red : ※ 引述《[email protected] (whc)》之銘言: : : 現在想要看兩個protein 的位置是否有relocalization : : 目前手上有pEGFP-N1 : : 簡單的想法用一個紅色螢光的蛋白 就可以觀察到 : : 不知道有什麼常用或好用的紅色蛋白可以使用? : : 另外就是使用confocal時 有什麼要注意的地方? : : 一個正要開始作的人^^" : 我也才剛開始作 xD 沒錯!!先去問清楚你要用的那台confocal規格是怎樣, 不要興緻勃勃地做了double staining之後, 發現只能看一個波長....那會很嘔的!! 一般常用的紅色螢光,除了大家講的之外, Rhodamine也是一個不錯的選擇。 其實要看confocal,前置的作業一定要做好, sample如果做不好,confocal再怎麼強,也沒辨法把圖掃得很美的。 上機前可以先用螢光顯微鏡檢查一下成果, 現在各校上機應該都是要收錢吧, 所以如果sample做得不美,不如重做比較好喔~ 加油~~ -- 批踢踢實業坊telnet://ptt.cc 國家科學院 → 科學學術研究院▌▍▋ Wikipedia 百 科 討 論 版  ▋▌▍ 歡 迎 全 世 界 一 起 加 入 累 積 知 識 的 維 基 世 界 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.35.20.159
blence:Rhodamine不是就上面說的TRITC嗎? 61.31.155.215 01/26
vmp:@@ (←眼花中) 218.35.20.159 01/26
keku:不一樣的螢光分子 但一樣的Channel(波段) 140.109.225.161 01/26
DreamShop:TRITC的R不就是rhodamine嗎? 59.104.2.92 01/27
Lipaty:現在一般說的Rodamine就是TRITC 61.223.27.202 01/27
Lipaty:trimethyl rhodamine isothiocynate 61.223.27.202 01/27
keku:嗯嗯 YEAH 140.109.225.161 01/27
oplz:tandem-RFP is also an good option since 134.174.178.197 01/27
oplz:you can do live imaging. 134.174.178.197 01/27
> -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: [email protected] (goodday), 看板: Biotech 標 題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 發信站: 生生不息 (Sat Jan 29 11:59:28 2005) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost ※ 引述《[email protected] (寂寞海灣)》之銘言: > ※ 引述《[email protected] (lpw4660)》之銘言: > : 只是用切成一片片的角度去照 這般的話如果是 > : 不在同一平面的話 2蛋白就不會在一起 > : 避免勿以為colocalization > : Ds-red的vector有許多適合紅色的 > ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ > 不好意思ㄟ!! > 有點看不懂??^^" > 我想問的是confocal顯微鏡的極限 > 可以見到細胞中分子那麼小嗎? > 還是只限制在cell大小的3D結構而已?? confocal 的精華不在能看到多小的分子 而是它能把一個樣品做垂直的細微切片觀察 因此能看到某螢光蛋白在 Z軸上的分布位置 如果能這麼簡單就看到蛋白質的分子形狀 就不會有人用 X-ray 繞射解結購 > < 生命科學可能很快就做到沒得做了 -- Origin: 中央生科˙生生不息 nculs.twbbs.org.tw Author: ubiquitin 61-218-73-116.HINET-IP.hinet.net 發表 > -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: [email protected] (寂寞海灣), 看板: Biotech 標 題: Re: [問題] 有關共扼焦顯微鏡 發信站: 不良牛牧場 (Sun Jan 30 14:08:25 2005) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost ※ 引述《[email protected] (goodday)》之銘言: : ※ 引述《[email protected] (寂寞海灣)》之銘言: : > ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ : > 不好意思ㄟ!! : > 有點看不懂??^^" : > 我想問的是confocal顯微鏡的極限 : > 可以見到細胞中分子那麼小嗎? : > 還是只限制在cell大小的3D結構而已?? : confocal 的精華不在能看到多小的分子 : 而是它能把一個樣品做垂直的細微切片觀察 : 因此能看到某螢光蛋白在 Z軸上的分布位置 : 如果能這麼簡單就看到蛋白質的分子形狀 : 就不會有人用 X-ray 繞射解結購 > < : 生命科學可能很快就做到沒得做了 謝謝你的回答^^" 我了解了 因為之前的網友給的參考資料中的圖片 都沒有說他的樣本是什麼 我都看的霧煞煞的@@ anyway 感恩感恩!! -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ Welcome to SimFarm BBS -- From : [218.162.117.89] ◣◣◢ ◢◢不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo ◣◣─╯