Re: [求救] 腫瘤鼠model induce!!

[lentivirus ()]

※ 引述《iamprada (熊寶)》之銘言：
: H大您好
: 目前實驗室正在進行的是腫瘤鼠的建立ˇ
: 若是能夠成功建立腫瘤鼠模型的話
: 將選用適當的inhibitor
: 將metastasis pathway target protein 做 block
: 並探討inhibitor對於腫瘤大小及轉移的抑制能力
: 只是其中注射部位 引發天數 以及測量技巧 能須重新確認
: 希望能提供您些許幫助
: 也希望有經驗的大大可以提供這方面協助!!
: 感謝!!


  有些意見提供你參考一下囉....

  1、 In vitro assay:

      利用boyden chamber來看看肝癌細胞株的invasion potential，

      確立invasive ability後，分別以藥物及控制組來驗證


      以scratch assay來看肝癌細胞株的migration potential，

      確立migration ability後，分別以藥物及控制組來驗證


      以cell viability assay來證明藥物對癌細胞並不會殺死癌細胞，

      而排除因細胞減少所造成invasion cell減少的false positive 的機率

      (不過有些藥物也可能是dual of function)


  2、 In vivo assay:

      建立 animal model，一般是以皮下注射或是尾靜脈注射，癌細胞注射的量

      一般約為1X10 6~7方，然後取時間點，犧牲老鼠，取organ固定，做HE stain

      來看是否此癌細胞株有轉移性。

      若以你文中提到的方式，一般做法大概是用尾靜脈注射，使癌細胞在肺形成

      nodule (也有可能在肝，要建立model才能知道，每種細胞株都不太一定)

      如果確定可行的話，再打一次老鼠，分組，給藥，

      有效沒效大概只能看一個course會不會使老鼠的survival延長，

      或者是tumor nodule減少

      以上 ^^""


  3、 Clinical sample (針對研究metastasis suppressor or enhancer expression)

      若是大家想研究某些基因對tumor metastasis的影響時，

      一般可以藉由stable expression target gene cell line 來進行 1，2的探討

      若是meta suppressor，則 invasion abitliy or migration ability impaired

      在in vivo 則可以看到 nodule 減少或是survival 延長(當然選用的細胞是以

      highly invasive cell line overexpress 某 putative meta suppressor)

      反之亦然，並且可以加入藥物抑制某meta enhance，或利用condition expression

      的方式來研究，並且在臨床病人檢體上探討其表現量與其預後的關係

      (以上補充一下 ^^")






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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.121.115.28
推 HIbaby:謝你詳細的回答
※ 編輯: lentivirus      來自: 140.109.49.184       (10/18 13:33)
推 iamprada:好詳盡的建議~感恩!! 之前也做類似的轉移實驗~我會試試看
推 KaurJmeb:這篇可以轉到biotech的姊妹部落格和wiki嗎？
推 lentivirus:恩~~沒問題...^^" (希望對大家有幫助...)
※ 編輯: lentivirus      來自: 59.121.119.21        (10/22 10:50)